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組織來源 | 腸 | 生長特性 | 貼壁 |
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細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 產品貨號 | YS-01X7856 |
細胞簡介:
大鼠腸成纖維分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內大的微生態系統。各種哺乳動物腸的結構和功能基本相似。腸壁結構一般分4層,由外向內依次為:漿膜層(腹腔臟層),平滑肌層,黏膜下層和黏膜層。平滑肌層的外層為縱行肌纖維,內層為環形肌纖維,兩者都以螺旋式走行,它們以收縮和舒張來完成腸的機械性消化。黏膜層又分為3層:靠近黏膜下層的是一層平滑肌,稱為黏膜肌層。其次為結締組織,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構成的黏膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠腸成纖維采用膠原酶-聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠腸成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腸 | 產品貨號 | YS-01X7856 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠腸成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
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細胞膜蛋白Derlin抗體
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RNA結合基元蛋白24(RBM24)重組蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24)
GIF重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 標簽) Protein
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大鼠腸成纖維細胞MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質金屬蛋白酶-9(抗原)
BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)
IL1B重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)
WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (His 標簽) Protein
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