大鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

| 商品屬性：

| 細(xì)胞介紹：

大鼠骨髓樹(shù)突狀分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；DC細(xì)胞，全稱樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)，是近年來(lái)倍受們關(guān)注的專(zhuān)職抗原呈遞細(xì)胞(APC)，能攝取、加工及呈遞抗原，啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn)，從脾臟中分離出一類(lèi)與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞，因其細(xì)胞膜向外伸出，形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹(shù)狀突起，故而命名為樹(shù)突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。

| 方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過(guò)程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓樹(shù)突狀(DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài) 樹(shù)突狀

傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

| 注意事項(xiàng)：

1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用。

| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒 ，英文名： ALP-B ELISA Kit

Rabbit S100B protein (S-100B) ELISA Kit 兔子S100B蛋白(S-100B)試劑盒

氣腫疽梭菌(CC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforMMP-1(HumanMaixmetalloproteinase1)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶1

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitMYO/MB犬肌紅蛋白

豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T

豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸試劑盒   48T

豬弓形蟲(chóng)(TOX)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T

豬弓形蟲(chóng)(TOX)核酸試劑盒   48T

半胱蛋白酶抑制劑樣蛋白1抗體

豬腦素/腦尿肽(BNP)ELISA 試劑盒

Human thyroid stimulating immunoglobulin (TSI) ELISA Kit 人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)試劑盒

guineapigEndothelin1,ET-1ELISAKit 豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforANA(HumanAi-nuclearAibody)ELISAKit人抗核抗體

血液(GLATHIONE)總濃度比色法定量試劑盒50次

Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit豬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒

原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體

IL1R2重組食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 蛋白  Protein

Melamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺 0.5mlMelamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺

S100A10重組人 S100A10 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ARL2BP Protein Human 重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CDCP1 Protein Mouse 重組小鼠 CDCP1 蛋白

大鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)Melamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺 0.5mlMelamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺

ARL2BP Protein Human 重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL1R2重組食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 蛋白  Protein

CDCP1 Protein Mouse 重組小鼠 CDCP1 蛋白

S100A10重組人 S100A10 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein