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組織來源 | 骨組織 | 生長特性 | 貼壁 |
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細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 產品貨號 | YS-01X7632 |
細胞簡介:
大鼠骨外膜分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內膜中含有一種能夠生成骨的細胞,稱為成骨細胞,這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞,稱為破骨細胞。這兩種細胞作用相反又相互依據。成骨細胞像建筑工人,不停地生成新的骨組織,破骨細胞則像維修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構,并且還負責拆除“違章建筑",就是除去不需要的多余的骨組織,從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。正常情況下,兩種細胞之間處于動態的平衡之中,完成骨的生長發育的新陳代謝。骨折之后,成骨細胞首先啟動,從而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢復了骨的連續性,往往不符合生物力學的需要,改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠骨外膜采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠骨外膜經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 骨組織 | 產品貨號 | YS-01X7632 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
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突觸融合蛋白1A抗體
CA9重組狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein
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PGC重組人 Pepsinogen C / PGC 蛋白 (His 標簽) Protein
ARF3 Protein Human 重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 (His 標簽)
EPHA3 Protein Mouse 重組小鼠 EphA3 蛋白
大鼠骨外膜細胞OAT4L又稱URAT1 (Urate Transporter 1 0.5mgOAT4L又稱URAT1 (Urate Transporter 1) 尿酸鹽重吸收轉運子1 (抗原)
ARF3 Protein Human 重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 (His 標簽)
CA9重組狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein
EPHA3 Protein Mouse 重組小鼠 EphA3 蛋白
PGC重組人 Pepsinogen C / PGC 蛋白 (His 標簽) Protein
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