大鼠骺軟骨細(xì)胞

| 商品屬性：

| 細(xì)胞介紹：

大鼠骺軟骨分離自骨骺生長板；骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織，其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂、成熟、肥大，終被骨組織所替換，對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些骺軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

| 方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠骺軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 ，英文名： BMP-6 ELISA Kit

Rabbit two D dimer (D2D) ELISA Kit 兔子D二聚體(D2D)試劑盒

普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-10(HumanMaixmetalloproteinase10)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶10

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitDes犬結(jié)蛋白

豬促卵泡素試劑盒   豬促卵泡素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬促卵泡素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬促卵泡素試劑盒、豬促卵泡素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒   豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒、豬促甲狀腺素釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬雌二醇受體試劑盒   豬雌二醇受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬雌二醇受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬雌二醇受體試劑盒、豬雌二醇受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒   豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒、豬傳染性胃腸病毒抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體

豬壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒

Human melanoma marker (MA/Melan-A) ELISA Kit 人黑色素瘤標(biāo)記物(MA/Melan-A)試劑盒

Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 兔抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforapo-B100(RabbitapoproteinB100)ELISAKit兔載脂蛋白B100

血清/血漿游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒10次

Porcinelipoproteinα,Lp-αELISAKit豬脂蛋白α(Lp-α)試劑盒

抑制素結(jié)合蛋白抗體

ALCAM重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GLP-2(Glucagon-like peptide-2 0.5mgGLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2(多肽抗原)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein

ANTXR1 Protein Human 重組人 ANTXR1 蛋白

ENPP2 Protein Mouse 重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠骺軟骨細(xì)胞GLP-2(Glucagon-like peptide-2 0.5mgGLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2(多肽抗原)

ANTXR1 Protein Human 重組人 ANTXR1 蛋白

ALCAM重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ENPP2 Protein Mouse 重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein

| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用。