細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠腦膜分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。硬腦膜，是一厚而堅(jiān)韌的雙層膜，外層是顱骨內(nèi)面的骨膜，僅疏松地附于顱蓋，特別是在枕部與顳部附著更疏松，稱為骨膜層。蛛網(wǎng)膜是一層半透明的膜，位于硬腦膜深部，其間有潛在性腔隙為硬腦膜下隙。軟腦膜是緊貼于腦表面的一層透明薄膜，并伸入溝裂。在腦室壁的某些部位，軟腦膜及其血管與室管膜上皮共同形成脈絡(luò)組織。脈絡(luò)組織中的血管反復(fù)分支成叢，突入腦室形成脈絡(luò)叢。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦膜成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右；1-2代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒

Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒

Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanCytotoxin-associatedprotein,CagA試劑盒人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)試劑盒

組織IKKβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanplasminogenactivatorinhibitor，PAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒

中文名稱   方法   規(guī)格

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit   ELISA. 

人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit   ELISA. 

人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit   ELISA.

Pacific Blue標(biāo)記小鼠NK1.1單克隆抗體

豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒

Human ai Ku aibody (ai-Ku-Ab) ELISA Kit 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)試劑盒

PorcineCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit 豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlb白蛋白(夾心法一步法)

血液型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量試劑盒20次

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)試劑盒

跨膜蛋白109抗體

IL13RA1重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原

CAT重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AKR1A1 Protein Human 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

大鼠腦膜成纖維細(xì)胞CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原

AKR1A1 Protein Human 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL13RA1重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CAT重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein