細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠前脂肪分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì)，終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對(duì)外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng)，可望成為軟組織缺損的有益填充物。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前脂肪采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒

Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒

Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞漿免疫球蛋白(CIg)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAngiopoietin2,ANG-2試劑盒人血管生成素2(ANG-2)試劑盒

植物脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次

Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)試劑盒

植物C(VC)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物B6(VB6)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物B12(VB12)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物A(VA)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

4號(hào)染色體開放閱讀框3抗體

豬(EPI)ELISA 試劑盒

Human kallikrein 11 (KLK 11) ELISA Kit 人11(KLK 11)試劑盒

GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforANG(Humanangiostatin)ELISAKit人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白

血液(CO2)濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒

蛋白質(zhì)精亞型3抗體

FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)

GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白  Protein

ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠前脂肪細(xì)胞過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)

ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白  Protein