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組織來源 | 腦組織 | 生長特性 | 貼壁 |
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細胞形態 | 球形 | 產品貨號 | YS-01X7437 |
細胞簡介:
大鼠神經干分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經干細胞具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有神經組織中,不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態下具有增殖、遷移,并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為神經系統損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩定的神經干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。神經干細胞在培養3-4d后,可形成神經球,神經球在培養基中呈懸浮生長,予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養瓶中,2×105個細胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養基1次,培養條件不變。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠神經干采用消化后差速貼壁,結合神經干細胞專用培養基培養篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠神經干經Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腦組織 | 產品貨號 | YS-01X7437 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 球形 |
培養信息:
培養基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%,Accutase
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
小鼠抗粒/中心體抗體(ACA)ELISA 試劑盒
Rat ai thyroid stimulating hormone receptor aibody (Ab) ELISA Kit 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒
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5-羥色胺受體6抗體
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低密度脂蛋白受體相關蛋白3抗體
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
reMOG 1-125 protein 重組髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白1-125 500ugreMOG 1-125 protein 重組髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白1-125
IL12A重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 標簽) Protein
ADPRH Protein Human 重組人 ADPRH / ARH1 蛋白 (His 標簽)
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白
大鼠神經干細胞reMOG 1-125 protein 重組髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白1-125 500ugreMOG 1-125 protein 重組髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白1-125
ADPRH Protein Human 重組人 ADPRH / ARH1 蛋白 (His 標簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白
IL12A重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 標簽) Protein
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