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組織來源 | 腎組織 | 生長特性 | 貼壁 |
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細胞形態 | 上皮細胞樣 | 產品貨號 | YS-01X7240 |
細胞簡介:
大鼠腎小管上皮分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質迷路內,于腎小體附近高度蟠曲;遠端小管曲部也稱為遠曲小管,位于皮質迷路內。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞,腎小管上皮細胞的分離、培養是研究腎臟疾病的一項重要技術,目前該分離方法有酶分離法、化學分離法篩網分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能:①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營養物質進入終尿;③細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子,通過產生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應;④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發生。隨著對腎間質纖維化機制研究的日漸加深,腎小管上皮細胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細胞模型,在腎小管間質疾病的發病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腎小管上皮采用先機械研磨過不銹鋼網篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化,結合上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腎小管上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腎組織 | 產品貨號 | YS-01X7240 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
小鼠內皮抑素(ES)ELISA 試劑盒
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整合素α5β3 英文名稱: Iegrin α5β3 英文縮寫: Iegrin α5β3
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Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 豬胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFA(Humanai-filaggrinaibody)ELISAKit人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體
血液氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次
MousesubstancePreceptor,SP-RELISAKit小鼠P物質受體(SP-R)試劑盒
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Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)
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ACPP Protein Human 重組人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 標簽)
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大鼠腎小管上皮細胞Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)
ACPP Protein Human 重組人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 標簽)
CADM3重組小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標簽) Protein
LIFR Protein Rat 重組大鼠 LIFR 蛋白 (His 標簽)
TXNL4B重組人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 標簽) Protein
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