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組織來源 | 外周血 | 生長特性 | 貼壁 |
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細胞形態 | 圓形 | 產品貨號 | YS-01X7564 |
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
大鼠外周血中性粒分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群,根據其形態、功能和來源部位可以分為三大類:粒細胞、單核細胞和淋巴細胞,其中粒細胞又可根據胞質中顆粒的染色性質不同,分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。中性粒細胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞質呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的顆粒。細胞核呈桿狀或2~5分葉狀,葉與葉間有細絲相連。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,胞漿內含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體,內含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,與細胞的吞噬和消化功能有關。中性粒細胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,它處于機體抵御微生物病原體,特別是在化膿性細菌入侵的線,具有很強的吞噬活性,可吞噬細菌、衰老的紅細胞、抗原一抗體復合物和壞死的細胞等。中性粒細胞內含有大量溶酶體酶,因此能將吞噬入細胞內的細菌和組織碎片分解。當中性粒細胞吞噬數十個細菌后,自身發生解體,所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細胞是人體內壽命短的細胞,一般體外培養12-24h內活性穩定,48h活性下降,96h基本死亡。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒經瑞氏染色法,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 外周血 | 產品貨號 | YS-01X7564 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 圓形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA 試劑盒
Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒
Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人絲蛋白酶(PRSS)pcr檢測試劑盒分裝
ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1試劑盒雞可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)試劑盒規格:96T/48T
腮腺病毒(MuV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
麻風桿菌(ML)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
莫氏立克次體(RM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
tinagl1抗體
著絲粒蛋白L抗體
NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細胞調亡素/死亡受體5抗原
PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein
IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標簽)
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細胞調亡素/死亡受體5抗原
IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標簽)
NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白
PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein
大鼠外周血中性粒細胞豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 ,英文名: IgA ELISA Kit
Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧誘導因子1α(HIF-1α)試劑盒
Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白
細菌檸檬酸利用試劑盒20次
rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)試劑盒規格:96T/48T
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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