大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞

| 商品屬性：

| 細(xì)胞介紹：

小鼠下頜骨成纖維分離自下頜骨組織；下頜骨位于面下部，呈弓形，圍成口腔的前壁和側(cè)壁，是面部能活動(dòng)的骨骼；其水平部分為下頜體，其垂直部分為下頜支，表層為骨密質(zhì)，內(nèi)部為骨松質(zhì)，與顳骨關(guān)節(jié)凹組成顳下頜關(guān)節(jié)。下頜體分內(nèi)、外兩面及上、下兩緣。下頜支分兩面、四緣及兩突。下頜支與顳骨形成關(guān)節(jié)。該關(guān)節(jié)非常靈活，可做出包括咀嚼動(dòng)作在內(nèi)的多種動(dòng)作下頜骨的骨小梁也順應(yīng)咀嚼肌的拉力和力傳送的方向而排列，斜向上后排列成線形；下頜骨的骨質(zhì)較致密，血供較差，除主要接受下齒槽動(dòng)脈血供外，又接受來(lái)自骨表面黏骨膜動(dòng)脈分支的血液供應(yīng)。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

| 方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下頜骨成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下頜骨成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

| 注意事項(xiàng)：

1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用。

| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠成肌分化蛋白(MyoD)試劑盒 ，英文名： MyoD ELISA Kit

Rat bladder tumor aigen (BTA) ELISA Kit 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒

RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 進(jìn)口分裝

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細(xì)胞氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次

RatCyclin-D2ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒

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Guaiacol   100g

鹽酸胍   100g

GuanidineHydrochloride   500g

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魚脫酶2(DIO2)ELISA試劑盒 ELISA 組裝/原裝

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swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)試劑盒 進(jìn)口分裝

ADVIgGVII腺病毒IgGⅦ型(間接法二步法)

血液乙醇脫氫酶III(S-亞硝基谷胱苷肽還原酶)活性比色法定量試劑盒20次

MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒

核糖體蛋白S6激酶1抗體

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趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)

CD1B & B2M重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

ABHD4 Protein Human 重組人 ABHD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NP Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標(biāo)簽)

大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)

ABHD4 Protein Human 重組人 ABHD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

DKK1重組人 DKK1 / Dkk-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

NP Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標(biāo)簽)

CD1B & B2M重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein