細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

大鼠牙齦上皮分離自牙齦組織；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅韌。牙齦邊緣稱為齦緣，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦，通稱牙床；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色，內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦上皮長期被認為是抵御口腔中持續(xù)存在的細菌的被動免疫屏障，隨著對牙周致病菌的不斷認識，發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障，上皮細胞還可以分泌抗菌多肽，參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的道屏障，在抵御牙周炎細菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用，建立正常牙齦上皮細胞體外培養(yǎng)體系，將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實驗模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素1(IL-1)試劑盒 ，英文名： IL-1 ELISA Kit

Rabbit collagenase II (Collagenase II) ELISA Kit 兔子膠原酶II(Collagenase II)試劑盒

ELISA 小鼠巨嗜細胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1)  進口分裝

CLIAKitforIL-23(HumanIerleukin23)ELISAKit人白介素23

通用型抗酸性0酸酶(SACP)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitGP-ⅡbⅢa大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa

乙醇脫氫酶（ADH）測定試劑盒（紫外比色法）

微量游離血紅蛋白（FHb）測定試劑盒（比色法）

超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒

測定試劑盒（紫外比色法）

KIAA1310蛋白抗體

鴨子白介素12(IL-12)試劑盒

Human aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒

Humanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 人淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforACV-A(HumanActivinA)ELISAKit人活化素A

血液組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性熒光定量試劑盒20次

mouseprolactin,PRLELISAKit小鼠催乳素(PRL)試劑盒

雙特異性磷酸酶5重組兔單克隆抗體

HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein

PAX9(Paired box gene 9 0.5mgPAX9(Paired box gene 9) 配對盒基因9抗原

CSF2RB重組人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (His 標簽) Protein

CALCB Protein Human 重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白

BMPR2 Protein Human 重組人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 標簽)

大鼠牙齦上皮細胞PAX9(Paired box gene 9 0.5mgPAX9(Paired box gene 9) 配對盒基因9抗原

CALCB Protein Human 重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白

HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein

BMPR2 Protein Human 重組人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 標簽)

CSF2RB重組人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (His 標簽) Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。