人微血管周細(xì)胞

| 商品屬性：

| 細(xì)胞介紹：

人微血管周分離自微血管組織；周細(xì)胞（pericyte）又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞，是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞，可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外，周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一，所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜，基膜上有多種細(xì)胞連接，包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控；毛細(xì)血管受損時(shí)，周細(xì)胞還可增殖，分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

| 方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人血管周采用膠原酶-聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人微血管周經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

| 注意事項(xiàng)：

1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用。

| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)試劑盒 ，英文名： PKCγ ELISA Kit

N- acetyl - seryl - aspayl -- lysyl - proline (AcSDKP 人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP

RatIerleukin15,IL-15ELISAKIT 大鼠白介素15(IL-15)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCXCR1(HumanCXC-chemokinereceptor1)ELISAKit人CXC趨化因子受體1

細(xì)胞色素P450亞酶CYP3A1(BROD)活性熒光定量試劑盒20次

RatFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒   96T/48T

小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)試劑盒   96T/48T

小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶（STK）試劑盒   96T/48T

小鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒   96T/48T

alpha 1腎上腺素能受體A抗體

小鼠糖化白蛋白(GA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒

Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 人白血病抗原(TLa)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChikenPullorumDiseaes,PD試劑盒雞白痢抗體檢測(PD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒-LEPTIN10/20次

Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體

BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

角蛋白2(KRT2)重組蛋白 Recombinant Keratin 2 (KRT2)

GAL重組人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CHL1 Protein Human 重組人 CHL-1 蛋白

HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 His 標(biāo)簽)

人微血管周細(xì)胞角蛋白2(KRT2)重組蛋白 Recombinant Keratin 2 (KRT2)

CHL1 Protein Human 重組人 CHL-1 蛋白

BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 His 標(biāo)簽)

GAL重組人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein