細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

人羊膜成纖維分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育，依靠胎盤從母體取得營養，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內層，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質，其光滑，無血管、神經及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜成纖維細胞主要來自基底膜、致密層、纖維母細胞層。

方法簡介：

實驗室分離的人羊膜成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的人羊膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人羊膜成纖維體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠合酶運輸因子(NOSIN)試劑盒 ，英文名： NOSIN ELISA Kit

Mouse urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒

MouseAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 小鼠血管生成素1(ANG-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCoronavirusesIgGELISAkit人流行性乙型腦抗體IgG

細胞BTK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBMP-2大鼠骨成型蛋白2

小鼠神經生長因子 (mouse NGF)   作用：   ELISA   規格：   96T*2   美國 Chemicon

小鼠骨橋蛋白 ( mouse Osteopoin)   作用：   ELISA   規格：   96T   德國 IBL

小鼠血小板衍化生長因子 (mouse PDGF-AA)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

小鼠血小板衍化生長因子 -B(mouse PDGF-AB)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

PAM16蛋白抗體

小鼠鼠痘病毒抗體(MPV-Ab)試劑盒 96T/48T

Human measles virus IgM (MV IgM) ELISA Kit 人麻疹病毒IgM(MV IgM)試劑盒

HumaalinELISAKit 人踝蛋白(talin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHC試劑盒鴨主要組織相容性復合體(MHC)試劑盒規格：96T/48T

藻類細胞甲磺酸乙脂突變誘導試劑盒10次

MouseCyclosporineA,CsAELISAKit小鼠A(CsA)試劑盒規格：96T/48T

腺苷三磷酸結合盒轉運體12抗體

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PP-2A (protein phosphatase 2A 0.5mgPP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白質0酸酶-2A(抗原)

USP7重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (aa 208-560, His & GST 標簽) Protein

CLIC1 Protein Human 重組人 CLIC1 蛋白

NBL1 Protein Human 重組人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 (Fc 標簽)

人羊膜成纖維細胞PP-2A (protein phosphatase 2A 0.5mgPP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白質0酸酶-2A(抗原)

CLIC1 Protein Human 重組人 CLIC1 蛋白

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

NBL1 Protein Human 重組人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 (Fc 標簽)

USP7重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (aa 208-560, His & GST 標簽) Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。