細胞簡介：

人胰腺星狀分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應細胞，PSC分離和成功培養是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達Desmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態與激活態兩種，并分別具有特異的標志物。靜息狀態PSC胞質內富含的A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽性表達Desmin。激活狀態PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發現，原代分離的細胞培養6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示，細胞接種24h仍然表達Desmin，48h后Desmin基本不再表達。培養48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA，隨著培養時間的增長和傳代次數的增加，細胞表達alpha-SMA，而不再表達Desmin，說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養第6d大多數細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發現：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化，導致細胞形態、功能發生變化，促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規則沉積。

方法簡介：

公司實驗室分離的人胰腺星狀采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人胰腺星狀經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：

大鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 ，英文名： IFN-γ ELISA Kit

Mouse ula sensitive C reactive protein (hs-CRP) ELISA Kit 小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒

ELISA 小鼠巨嗜細胞性蛋白-3β(mouse MIP-3β)  進口分裝

CLIAKitforIL-18(HumanIerleukin18)ELISAKIT人白介素18

通用型李屬壞死環斑病毒(PrunusNecroticRingspotVirus;PSV)試劑盒20次

ELISAKitGMP-140大鼠血漿α顆粒膜蛋白

小鼠上腺髓質素(ADM)試劑盒   96T/48T

小鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)試劑盒   96T/48T

小鼠上腺素(E)試劑盒   96T/48T

小鼠神經營養因子4(-4)試劑盒   96T/48T

PE-Cy5標記人CD63單克隆抗體

小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Caenorhabditis elegans death gene (CED-3) ELISA Kit 人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)試劑盒

Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 人血栓前體蛋白(TpP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Elisa牛結核病抗體試劑盒2*96孔2*96孔

增強型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次

MouseCyclin-D1ELISAKit小鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)試劑盒規格：96T/48T

透明質酸及粘蛋白1抗體

SFRP1重組人 sFRP1 / SARP2 蛋白 Protein

纖溶酶原(Plg)重組蛋白 Recombinant Plasminogen (Plg)

TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CLK3 Protein Human 重組人 CLK3 蛋白 (GST 標簽)

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

人胰腺星狀細胞纖溶酶原(Plg)重組蛋白 Recombinant Plasminogen (Plg)

CLK3 Protein Human 重組人 CLK3 蛋白 (GST 標簽)

SFRP1重組人 sFRP1 / SARP2 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (Fc 標簽) Protein