細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

兔肺大靜脈內皮分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環的低壓、低阻的狀態，必須保證整個肺循環系統的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經過左心室收縮進入體循環，才能避免肺動脈內壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肺大靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔肺大靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳1-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠細胞周期素D1(CCND1)試劑盒 ，英文名： CCND1 ELISA Kit

Mouse three iodothyronine (T3) ELISA Kit 小鼠三甲狀腺原(T3)試劑盒

MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 小鼠S100蛋白(S-100)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHSVII-Ab(HumanHerpessimplexvirusIIaibody)ELISAKit人單皰疹病毒Ⅱ型抗體

細胞IKKβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitLTE4大鼠白三烯E4

小鼠內皮素-1   英文名稱：   Endothelin-1   英文縮寫：   ET-1

小鼠嗜酸性粒細胞趨化因子   英文名稱：   Eotaxin   英文縮寫：   Eotaxin

小鼠促紅細胞生成素   英文名稱：   erythropoietin   英文縮寫：   EPO

小鼠紅細胞生成素受體   英文名稱：   erythropoietin receptor   英文縮寫：   EPOR

脫支酶同源蛋白DBR1抗體

小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ornithine carbamoyl ansferase (OCT) ELISA Kit 人鳥氨基甲酰轉移酶(OCT)試劑盒

Humanmultidrugresistance-associatedprotein,MRPELISAKit 人多藥耐藥相關蛋白(MRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineapigIerleukin-12,IL-12/P70試劑盒豚鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒20次

MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒規格：96T/48T

DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗體

MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein

IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標簽)

TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白

兔肺大靜脈內皮細胞IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原

CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標簽)

MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein

TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。