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生長特性 | 貼壁 | 組織來源 | 關節囊 |
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細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 產品貨號 | YS-01X8362 |
細胞簡介:
兔關節囊成纖維分離自關節囊組織;關節囊(articular capsule)是由結締組織構成的膜囊,附著于關節的周圍,密封關節腔。關節囊的壁共有兩層:外層為纖維層;內層為滑膜層。纖維層實際上是一個連結骨的骨膜向另一骨骨膜的移行。纖維層厚而堅韌,由致密結締組織構成,含有豐富的血管和神經。其淺層纖維多呈縱行排列;深層纖維主要為環行纖維。纖維層的厚薄,各個關節不相同,即是在同一關節中,各部也不一致一般在運動范圍小的或是負重較大的關節中,都較厚而緊張,相反,于運動靈活的關節,則較薄而松弛。有的關節囊的部分纖維囊缺如,僅一層滑膜層;有的部分明顯增厚,形成韌帶。滑膜層薄而柔潤,是由疏松結締組織構成,襯在纖維層內面,周緣附著在關節軟骨的邊緣。它朝向關節腔的內面光而發亮,此面上蓋有一層內皮細胞。滑膜向關節腔分泌滑液,滑液是稍粘稠而透明的液體,可減少關節中相連骨的摩擦,是一種滑潤劑。滑膜表面可形成絨毛或皺襞突入關節腔內。有時滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出,形成滑膜囊,常位于肌腱與骨面之間。有時滑膜層突出不明顯,僅呈深窩狀,稱為囊狀隱窩。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
實驗室分離的兔關節囊成纖維采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔關節囊成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 關節囊 | 產品貨號 | YS-01X8362 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:基礎培養基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔關節囊成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
人抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒
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溶酶體絲蛋白酶DPP2抗體
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beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
兔關節囊成纖維細胞beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein
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