細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

兔神經(jīng)小膠質(zhì)分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的一種，相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細胞，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的第一道也是主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞的20%，小膠質(zhì)細胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng)，斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源，如腫瘤壞死因子(TNF)，一氧化氮，白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細胞的主要功能：①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中；②當(dāng)程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞；③膠質(zhì)細胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原，能進行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。

方法簡介：

實驗室分離的兔神經(jīng)小膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的兔神經(jīng)小膠質(zhì)經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：（12mM）

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔神經(jīng)小膠質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠骨形成蛋白6(BMP6)試劑盒 ，英文名： BMP6 ELISA Kit

People aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒

RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforEMAIgA(Humanai-EndomysialAibodyIgA)ELISAKit人抗肌內(nèi)膜抗體IgA

細胞內(nèi)核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG流式細胞分析試劑盒10次

RatIerleukin8,IL-8ELISAKit大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠細胞色素P450(mouse Cytochrome P450)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體

白介素22受體結(jié)合蛋白抗體

TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19

TXNDC17重組人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein

CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重組人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白

SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白

CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19

CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重組人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白

TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白

TXNDC17重組人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein

兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞小鼠(VE)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat CrossLaps ELISA Kit (Cr) 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒

Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人脫輕酶(SDH)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenIerleukin6,IL-6試劑盒雞白介素6(IL-6)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞IL蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISAKit小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取