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豬主動脈平滑肌細胞

參  考  價:2800 - 6200 /件
具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2025-01-20 09:50:13瀏覽次數:48次

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生長特性 貼壁 組織來源 主動脈
細胞形態 成纖維細胞樣 產品貨號 YS-01X8560
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細胞傳代步驟:

豬主動脈平滑肌細胞
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介:

豬主動脈平滑肌細胞

豬主動脈平滑肌分離自主動脈組織;主動脈是體循環的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側第2胸肋關節高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關節高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發生、發展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關發病機制是目前研究的熱點;體外培養的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介:

豬主動脈平滑肌細胞

實驗室分離的豬主動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測:

豬主動脈平滑肌細胞

實驗室分離的豬主動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

豬主動脈平滑肌細胞

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

組織來源

主動脈

產品貨號

YS-01X8560

生長特性

貼壁

細胞形態

成纖維細胞樣

 

培養信息:

豬主動脈平滑肌細胞

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態:成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內狀態佳

消化液:0.25%

培養條件:氣相:空氣,95%CO25%

豬主動脈平滑肌體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。

豬主動脈平滑肌細胞

細胞復蘇步驟:
豬主動脈平滑肌細胞
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

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細胞凍存步驟:
豬主動脈平滑肌細胞
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取


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