Surv人抗存活素抗體/生存蛋白ELISA試劑盒

大鼠前列腺素F2αELISA檢測PGF2α    Human Mannose,MN ELISA
大鼠白三烯E4ELISA檢測LTE4    Human mannose receptor,MR ELISA
大鼠尿激酶ELISA檢測UK    Human CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN ELISA
大鼠凝血因子ⅫELISA檢測FⅫ     Human formylmethionine,fMet ELISA
Surv人抗存活素抗體/生存蛋白ELISA試劑盒 途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。

大鼠凝血因子ⅩⅢELISA檢測FⅩⅢ    Human ICE protease-activating factor,IRAP ELISA
大鼠凝血因子ⅢELISA檢測FⅢ    Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA
大鼠載脂蛋白ELISA檢測HApo-H     Human Protein Z ELISA
大鼠白介素2受體ELISA檢測IL-2R     Human Protein S ELISA
大鼠腎上腺髓質(zhì)素ELISA檢測ADM     Human soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA
大鼠β內(nèi)啡肽受體ELISA檢測β-EPR    Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA 
大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2ELISA檢測CAMK 2    Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA
大鼠肝脂酶ELISA檢測HL    Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA 
大鼠煙堿型乙酰膽堿受體ELISA檢測N-AChR    Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

然而，影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。