AMA人抗心肌抗體ELISA試劑盒

人腮腺炎病毒IgG 酶聯免疫    SM人鞘磷脂酶聯免疫 
EBv IgM人EB病毒IgM酶聯免疫    SMM人平滑肌肌球蛋白酶聯免疫 
EBv IgA人EB病毒IgA酶聯免疫    SmIg人細胞膜表面免疫球蛋白酶聯免疫 
EBv IgG人EB病毒IgG酶聯免疫    sMHC-2小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2酶聯免疫 
AMA人抗心肌抗體ELISA試劑盒 途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。

Leishimaria Ab人利什曼原蟲抗體酶聯免疫    sMHC-1小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1酶聯免疫 
DF-Ab人登革熱抗體酶聯免疫    sMHC-1人可溶性肌球蛋白重鏈1酶聯免疫
FLU人流感病毒抗體IgG酶聯免疫    SMAF人特異性巨噬細胞武裝因子酶聯免疫 
ADV-IgM人腺病毒IgM酶聯免疫    Smad7大鼠 酶聯免疫 
ADV-IgG人腺病毒IgG酶聯免疫    Smad1大鼠 酶聯免疫 
RV人輪狀病毒IgM 酶聯免疫    sm Actinin-α人橫紋肌輔肌動蛋白α  酶聯免疫
ECHO IgM人艾柯病毒IgM酶聯免疫    sm Actinin-α 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α酶聯免疫
RSV人抗呼吸道合胞病毒抗體酶聯免疫    sLR小鼠可溶性瘦素受體酶聯免疫 
MV IgM人麻疹病毒IgM酶聯免疫    sLR人可溶性瘦素受體酶聯免疫

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

然而，影響Elisa試驗結果的因素很多，故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。