MPO-ANCA IgG人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgGELISA試劑盒

sRANKL人可溶性核因子κB受體活化因子配基酶聯免疫    PKA人蛋白激酶A酶聯免疫
1,25-OH2D3/DVD/DHVD 3人1,25二羥基維生素D3酶聯免疫    PI小鼠胰島素原酶聯免疫
histon-H2b人組蛋白H2b酶聯免疫    PI人胰島素原酶聯免疫
OPG人骨保護素酶聯免疫     PI大鼠胰島素原酶聯免疫
MPO-ANCA IgG人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgGELISA試劑盒途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。

BMPR-Ⅱ人骨成型蛋白受體Ⅱ酶聯免疫    PIPLC人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C酶聯免疫 
BMPR-1A人骨成型蛋白受體1A酶聯免疫    Pim1人前病毒整合位點1酶聯免疫
BMP-4人骨成型蛋白4酶聯免疫    pIKBα人磷酸化核因子κB抑制蛋白α酶聯免疫
BMP-2人骨成型蛋白2酶聯免疫    pIKBα大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α酶聯免疫
cAMP人環磷酸腺苷酶聯免疫    PI3K小鼠磷酸肌醇3激酶酶聯免疫
MASP人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶酶聯免疫    PI3K人磷酸肌醇3激酶酶聯免疫
CDK-7人周期素依賴性激酶7酶聯免疫    PI3K大鼠磷酸肌醇3激酶酶聯免疫
CDK-2人周期素依賴性激酶2酶聯免疫    PI Ab-IgG/IgM小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM酶聯免疫
CDK-1人周期素依賴性激酶1酶聯免疫     PI Ab-IgG/IgM人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM酶聯免疫

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

然而，影響Elisa試驗結果的因素很多，故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。