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PS人潑尼松龍ELISA試劑盒
豬雌二醇受體ELISA檢測ER TRANCE人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子酶聯免疫
豬補體蛋白3ELISA檢測C3 TRAIL-R4人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4酶聯免疫
豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白ELISA檢測OT/BGP TRAIL-R4大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4酶聯免疫
豬腎上腺素ELISA檢測EPI TRAIL-R3兔子腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3酶聯免疫
PS人潑尼松龍ELISA試劑盒途:
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒 的含量。
豬脂蛋白αELISA檢測Lp-α TRAIL-R3人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3酶聯免疫
豬促甲狀腺素釋放激素ELISA檢測TRH TRAIL-R3雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3酶聯免疫
豬抗凝血酶受體ELISA檢測ATR TRAIL-R3大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3酶聯免疫
豬組胺ELISA檢測HIS TRAIL-R1人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1酶聯免疫
豬雌二醇ELISA檢測E2 TRAIL-R1大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1酶聯免疫
豬轉化生長因子β1ELISA檢測TGF-β1 TRACP-5b小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b酶聯免疫
豬腫瘤壞死因子αELISA檢測TNF-α TRACP-5b人抗酒石酸酸性磷酸酶5b酶聯免疫
豬脂聯素ELISA檢測ADP TRACP-5b大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b酶聯免疫
豬載脂蛋白B100ELISA檢測apo-B100 TRAb小鼠抗促甲狀腺素受體抗體酶聯免疫
步驟一
雙抗體夾心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。
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