SAA3人血清淀粉樣蛋白A3ELISA試劑盒

DBA雙花扁豆凝集素ELISA檢測     RANTES/CCL5大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子酶聯(lián)免疫 
CAM植物鈣調(diào)素ELISA檢測     RANKL小鼠核因子κB受體活化因子配基酶聯(lián)免疫
ABA 植物激素脫落酸ELISA檢測    RANKL兔核因子κB受體活化因子配基酶聯(lián)免疫 
VK1植物維生素K1ELISA檢測     RANKL大鼠核因子κB受體活化因子配基酶聯(lián)免疫
SAA3人血清淀粉樣蛋白A3ELISA試劑盒途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。

VB12植物維生素B12ELISA檢測     RANKL倉鼠核因子κB受體活化因子配基酶聯(lián)免疫
VA植物維生素AELISA檢測     RANA人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原酶聯(lián)免疫 
VE植物維生素EELISA檢測     RAGE/AGER人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體酶聯(lián)免疫
VD2植物維生素D2ELISA檢測     RAG-2人重組激活基因2酶聯(lián)免疫 
VD3植物維生素D3ELISA檢測     RAG-1人重組激活基因1酶聯(lián)免疫
VD植物維生素DELISA檢測     rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA
VB6物維生素B6ELISA檢測     Rabbit catecholamine,CA兔兒茶酚胺CA酶聯(lián)免疫 酶聯(lián)免疫 
ADP小鼠脂聯(lián)素酶聯(lián)免疫    Qa-2小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2酶聯(lián)免疫 

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

然而，影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。