CAD人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶ELISA試劑盒

AACV-A大鼠活化素ELISA檢測    ALP-B人骨特異性堿性磷酸酶B酶聯免疫
AACV-A豬活化素ELISA檢測     ALP人堿性磷酸酶酶聯免疫 
AAV人腺相關病毒    ALT/GPT人氨酸轉氨酶/谷轉氨酶酶聯免疫 
AAV人腺相關病毒ELISA檢測    AMA IgA人抗髓磷脂抗體IgA酶聯免疫 
ABA 植物激素脫落酸ELISA檢測    AMA人抗單核細胞抗體酶聯免疫

CAD人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶ELISA試劑盒途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。

6-keto-PGF1a小鼠6酮前列腺素F1a     AFP-L2人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2酶聯免疫ABAb人抗腦組織抗體     AMA人抗心肌抗體酶聯免疫
ABAb兔抗腦組織抗體ELISA檢測     AMBP人α1微球蛋白/bikunin前體酶聯免疫
ABCA1人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1     Amebiasis人阿米巴酶聯免疫
ABCG2人腺苷三磷酸結合盒轉運體G2    AMPK人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶酶聯免疫
ABM-Ab人抗肺泡基底膜抗體     AMS/AMY人α淀粉酶酶聯免疫 
ABMPR-1A大鼠骨成型蛋白受體1ELISA檢測    Amylin人胰淀素酶聯免疫
ABP人雄激素結合蛋白    ANA人抗核抗體酶聯免疫
AC-1人腺苷酸環化酶1     ANA人抗核仁抗體酶聯免疫 
ACA/CENP人抗著絲點抗體    ANA人抗中性粒細胞抗體酶聯免疫 
ACA-IgA人抗心磷脂抗體IgA    ANF人心納素酶聯免疫 

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

然而，影響Elisa試驗結果的因素很多，故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。