SAA人血清淀粉樣蛋白AELISA試劑盒

M-CSF小鼠巨噬細胞集落刺激因子    OSM小鼠抑瘤素M酶聯(lián)免疫
MCT人肥大細胞類胰蛋白酶    PDGFsR-α小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α酶聯(lián)免疫
MCV人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體     PDGF-AB小鼠血小板衍生生長因子AB酶聯(lián)免疫
MDA人二醛    P-Selectin/CD62P小鼠P選擇素酶聯(lián)免疫
MDA小鼠二醛    PAL小鼠L苯氨酸解氨酶酶聯(lián)免疫

SAA人血清淀粉樣蛋白AELISA試劑盒 途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒 的含量。

MDC/CCL22大鼠巨噬細胞來源的趨化因子ELISA檢測    sCD30L小鼠可溶性CD30配體酶聯(lián)免疫
MDC/CCL22人巨噬細胞來源的趨化因子    SCF/MGF小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子酶聯(lián)免疫
MDC/CCL22小鼠巨噬細胞來源的趨化因子    SDF-1β/CXCL12小鼠基質細胞衍生因子1β酶聯(lián)免疫
MEPE人細胞外基質磷酸糖蛋白     TGF-β1小鼠轉化生長因子β1酶聯(lián)免疫
Methylase人甲基化酶    TNFsR-Ⅰ小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ酶聯(lián)免疫
Methylase小鼠甲基化酶    TNFsR-Ⅱ小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ酶聯(lián)免疫
MF/MPF人促有絲分裂因子     TNF-α小鼠腫瘤壞死因子α酶聯(lián)免疫 

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

然而，影響Elisa試驗結果的因素很多，故加強各個環(huán)節(jié)的質量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。