ANG-Ⅱ人血管緊張素ⅡELISA試劑盒

OxLDL兔子氧化低密度脂蛋白ELISA檢測    D3Cyclin-D3小鼠細胞周期素酶聯免疫
OxLDL豬氧化低密度脂蛋白ELISA檢測    Cyclin-D2小鼠細胞周期素D2酶聯免疫
OXR人食欲素受體    E小鼠雌激素酶聯免疫
OXR豬食欲素受體ELISA檢測    Cyclin-D1小鼠細胞周期素D1酶聯免疫
p190/bcr-abl人癌基因蛋白質     MBP小鼠髓磷脂堿性蛋白酶聯免疫

ANG-Ⅱ人血管緊張素ⅡELISA試劑盒途：
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。

PⅠCP人Ⅰ型前膠原羧基端肽    αTGF-α小鼠轉化生長因子酶聯免疫
PⅠCP小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽    AFP小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白酶聯免疫
PⅠNP人Ⅰ型前膠原N端前肽    PAP小鼠前列腺酸性磷酸酶酶聯免疫
P27人P27蛋白    PSA小鼠前列腺特異性抗原酶聯免疫
p2人神經髓鞘蛋白     CA125小鼠卵巢癌標志物酶聯免疫
PⅢNP人Ⅲ型前膠原肽    CA153小鼠乳腺癌標志物-酶聯免疫
PⅢNP兔子Ⅲ型前膠原肽ELISA檢測    CA199小鼠胃腸癌標志物酶聯免疫PⅢNP小鼠Ⅲ型前膠原肽    HO-1小鼠血紅素氧合酶1酶聯免疫
PⅢNT大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽ELISA檢測    PL-A2小鼠磷脂酶A2酶聯免疫
PⅢNT兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽ELISA檢測    TFPI小鼠組織因子途徑抑制物酶聯免疫

步驟一

雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

然而，影響Elisa試驗結果的因素很多，故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。