細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡介：

兔腹膜間皮分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜，主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成，藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜，由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成，薄而光滑，呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液，在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細(xì)胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮，是覆蓋于腹膜表面的一層細(xì)胞。間皮細(xì)胞是構(gòu)成間皮的細(xì)胞，正常大小約為15-25微米，細(xì)胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑，使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護(hù)，不會互相磨損受傷。而間皮所生產(chǎn)的潤滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的物質(zhì)來達(dá)成，分泌物多半為細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì)。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹膜間皮采用混合膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹膜間皮經(jīng)PCK、Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腹膜間皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒

Human tumor necrosis factor alpha conveing enzyme (TACE) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)試劑盒

Humanproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)

HumanleukocyteaigenA，HLA-AELISAKit人類白細(xì)胞抗原A(HLA-A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂蛋白a試劑盒   人脂蛋白a試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂蛋白a試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白a試劑盒、人脂蛋白a 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒   人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒、人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒   人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒、人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人整合素連接激酶1試劑盒   人整合素連接激酶1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人整合素連接激酶1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人整合素連接激酶1試劑盒、人整合素連接激酶1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

促黃體生成素受體抗體

豚鼠白介素8(IL-8)試劑盒 ，英文名： IL-8 ELISA Kit

Two adenosine monophosphate (ADP) ELISA Kit 人二0酸腺苷(ADP)試劑盒

rabbitSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit 兔子S100B蛋白(S-100B)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-EPRELISAKit大鼠β內(nèi)啡肽受體

細(xì)菌血液瓊脂平板50個

RabbitHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit兔熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒規(guī)格：96T/48T

鳥苷酸環(huán)化酶α2/GCS-α-2抗體

EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 Protein

Melamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgMelamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白

FES重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ING4 Protein Human 重組人 ING4 蛋白

EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白

兔腹膜間皮細(xì)胞Melamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgMelamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白

ING4 Protein Human 重組人 ING4 蛋白

EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 Protein

EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白

FES重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。