細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

大鼠直腸黏膜上皮分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以門而終。直腸上端的大小似結腸，其下端擴大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細接管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的大鼠直腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠直腸黏膜上皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP5)試劑盒 ，英文名： MIP5 ELISA Kit

Monkey acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒

RatgranzymesA,Gzms-AELISAKit 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFRA(Humanfibronectioelatedaigen)ELISAKit人纖維連接素相關抗原

細胞肌酸激酶(CK)活性酶動力比色法定量試劑盒25次

RatPhosphorylatedacetyl-CoAcatboxylase,pACCaseELISAKit大鼠0酸化乙酰羧化酶(pACCase)試劑盒規格：96T/48T

生化試劑盒

谷酰胺測試盒   Glamine test kit

谷酸測試盒   Glamate test kit

谷酰胺、谷酸（兩種均可測）   Glamine and glamic acid (two can be measured)

丙酮酸脫氫酶E2抗體

豚鼠調節激活正常T-細胞表達分泌因子(RAES)試劑盒 ，英文名： RAES ELISA Kit

Human secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) ELISA Kit 人分泌性白細胞蛋白酶抑制因子(SLPI)試劑盒

rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 兔子巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBCDF(HumanBcelldifferetiationfactor)ELISAKit人B細胞分化因子

纖維素分解活力(FIBRINOLYTIC)試劑盒20次

RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit兔子膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒規格：96T/48T

球蛋白樣結構域受體1抗體

CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

神經束蛋白(NFASC)重組蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC)

ARF1重組人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein

IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

大鼠直腸黏膜上皮細胞神經束蛋白(NFASC)重組蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC)

IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白

CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

ARF1重組人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。