細胞簡介：

大鼠退行性椎間盤髓核分離退行性椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質；周圍部的纖維環，由多層纖維軟骨環按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結構的一部分，位于兩軟骨板與纖維環之間。由縱橫交錯的纖維網狀結構即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質構成的彈性膠凍物質。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構成髓核的主要物質是大量蛋白多糖復合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠退行性椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的大鼠退行性椎間盤髓核經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：基礎培養基，含FBS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每3-4天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：梭形、多角形

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠退行性椎間盤髓核體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：

大鼠內脂素(VF)試劑盒 ，英文名： VF ELISA Kit

Monkey ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 猴α干擾素(IFN-α)試劑盒

RatcoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 大鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGlycoproteinVI(Human)ELISAKit人糖蛋白VI

細胞非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次

RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒規格：96T/48T

樹突狀細胞相關C型凝集素-1   英文名稱：   Human Dendritic cell Associated C type Lectin 1   英文縮寫：   Dectin 1

二氫二醇脫氫酶   英文名稱：   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   英文縮寫：   DDH2

多巴胺   英文名稱：   Human Dopamine   英文縮寫：   DPN

強啡肽   英文名稱：   Human Dynorphin   英文縮寫：   DYN

FITC標記人CD11a單克隆抗體

豚鼠胰島素樣生長因子1(IGF1)試劑盒 ，英文名： IGF1 ELISA Kit

Human Mycoplasma pneumoniae aibody (MP-Ab) ELISA Kit 人肺支原體抗體(MP-Ab)試劑盒

rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 兔子基質金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBcl-2(MouseB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKIT小鼠B細胞淋巴瘤因子2

纖維蛋白溶酶(PLASMIN)活性熒光定量試劑盒20次

rabbitCoicosterone,COELISAKit兔子皮質同/腎上腺同(CO)試劑盒規格：96T/48T

核受體相互作用蛋白3抗體

MME重組大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase 0.5mgDRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原

PRDX2重組人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 蛋白 Protein

IgG2 Protein Human 重組人 IgG2-Fc 蛋白 (257 Ser/Ala)

CD36 Protein Mouse 重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His & Fc 標簽)

大鼠退行性椎間盤髓核細胞DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase 0.5mgDRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原

IgG2 Protein Human 重組人 IgG2-Fc 蛋白 (257 Ser/Ala)

MME重組大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

CD36 Protein Mouse 重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His & Fc 標簽)

PRDX2重組人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 蛋白 Protein