細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

大鼠胚成纖維分離自胚胎；成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養常用的飼養層細胞，能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優于外源添加的一些因子，而且可以為ES細胞的培養提供類似于體內的微環境，故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠胚成纖維采用消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的大鼠胚成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠胚成纖維體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠細胞球蛋白(CYGB)試劑盒 ，英文名： CYGB ELISA Kit

Mouse growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒

Mouseplateletactivatingfactor,PAFELISAKIT 小鼠血小板活化因子(PAF)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHSP47ELISAKit大鼠熱休克蛋白47

細胞L-乳酸比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIL-1α大鼠白介素1α

小鼠C反應蛋白   英文名稱：   C-reactive protein   英文縮寫：   CRP

小鼠CXC趨化因子受體3   英文名稱：   CXC chemokine receptor 3   英文縮寫：   CXCR3

小鼠CXC趨化因子配體16   英文名稱：   CXC chemokine ligand 16   英文縮寫：   CXCL16

小鼠CXCL1/KC   英文名稱：   CXC chemokine ligand 1   英文縮寫：   CXCL1/KC

FOXD4L2蛋白抗體

細胞質PSD95相互作用因子抗體

PCSK9重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白 Protein

CD133 造血干細胞抗原(多肽抗原 0.5mgCD133 造血干細胞抗原(多肽抗原)

H1F0重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白 Protein

FCER2 Protein Human 重組人 CD23 / FCER2 蛋白

CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標簽)

CD133 造血干細胞抗原(多肽抗原 0.5mgCD133 造血干細胞抗原(多肽抗原)

FCER2 Protein Human 重組人 CD23 / FCER2 蛋白

PCSK9重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白 Protein

CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標簽)

H1F0重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白 Protein

大鼠胚成纖維細胞小鼠過氧化酶(GSH-Px)pcr檢測試劑盒

Human retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 人結合蛋白4(RBP-4)試劑盒

Humanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit 人晚期糖基化終末產物(AGEs)pcr檢測試劑盒分裝

HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASA試劑盒人抗骨骼肌抗體(ASA)試劑盒規格：96T/48T

植物細胞轉染試劑盒10次

Humanueinsulin,TIELISAKit人真胰島素(TI)試劑盒規格：96T/48T

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。