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細胞名稱 非洲綠猴腎細胞;Vero E6
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是VERO 76 細胞的一個克隆,1979年由P.J. Price通過有限稀釋法獲得。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:4傳代,每周換液2~3次
傳代情況 P25
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內進行。
凍存培養基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
品 含量測定 100mg
130570-200501 磷霉素鈉 對照品 紅外鑒別 100mg
140601-200522 酪蛋白 標準試劑 效價測定 7g/支
140602-200313 可溶性淀粉 標準試劑 效價測定 10g
140604-200623 尿激酶 標準品 供尿激酶效價測定用 待定
140605-200424 凝血酶(牛血) 標準試劑 供尿激酶效價測定用 190BP/支
140606-200523 纖維蛋白溶酶原(牛血)(牛纖溶酶原) 標準試劑 供尿激酶效價測定用試劑 12U/支
140607-200535 牛纖維蛋白原 標準試劑 供尿激酶效價測定用 72mg可凝蛋白/支
140608-200311 牛血紅蛋白 標準試劑 效價測定 5g/支
140609- L-酪氨酸 對照品 效價測定 待定
140610-200511 溶酶小球菌底物 標準試劑 效價測定 15mg
140611-200102 輔酶Q10 對照品 含量測定 25mg
141612-200506 牛膽鹽 標準試劑 效價測定 1.5g
140613-200543 磷酸轉乙酰化酶 標準試劑 供輔酶A效價測定用標準試劑 45U/支
140614- 乙酰磷酸二鋰鹽 標準試劑 效價測定 待定
140615-200206 胰蛋白酶 對照品 效價測定 0.1克/瓶
140618-200302 蛋白低分子量標準(SDS法) 對照品 約3毫克
140619- 血清白蛋白(牛) 對照品
LISA Kit 兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白
cTnT (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特異性肌鈣蛋白T
LZM (Rabbit Lysozyme) ELISA Kit 兔溶菌酶
PRL (Rabbit prolactin) ELISA Kit 兔子催乳素
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黃體激素
ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 兔抗腦組織抗體
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53
BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit 兔Bcl-2相關X蛋白
ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit 兔阿霉素
MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit 兔基質金屬蛋白酶2/明膠酶A
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M
ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 兔血管生成素2
ANG- II (Rabbit angiotension II ) ELISA Kit 兔血管緊張素Ⅱ
sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 兔可溶性凋亡相關因子
6-keto-PGF1a (Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 兔6酮前列腺素F1a
TXB2 (Rabbit Thromboxane B2) ELISA Kit 兔血栓素B2
非洲綠猴腎細胞;Vero E6VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 兔血管內皮細胞粘附分子1
Fbg (Rabbit Fibrinogen) ELISA Kit 兔血纖蛋白原
D2D (Rabbit D-Dimer) ELIS
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