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細胞名稱 狗腎細胞;Super Tube
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細胞株MDCK (ATCC CCL-34),從中克隆建立了狗上皮樣細胞株Super Tube。 當維持高細胞濃度時,Super tube形成大量的小管(據報道,24孔板的每孔鋪7x105細胞,3天內就能形成小管)。 要形成小管,細胞需要每天兩次換液以提供足夠養分。 與原始細胞株相比,Super Tube的c-AMP的檢測水平低得多,在forskolin刺激下讀出的腺苷環化酶水平也低;它的跨上皮抗性也比Super Dome (ATCC CRL- 2286) 和
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
紐甜相關物質A標準品 Neotame Related Compound A 15mg
129618-40-2 無水奈韋拉平標準品 Nevirapine Anhydrous 100mg
129618-40-2 半水奈韋拉平標準品 Nevirapine Hemihydrate 100mg
133627-17-5 奈韋拉平相關物質A標準品 15mg
287980-84-1 奈韋拉平相關物質B標準品 15mg
98-92-0 煙酰胺標準品 Niacinamide (Vitamin B3) 500mg
6019-6-3 二水合重酒石酸尼古丁標準品 Nicotine Bitartrate Dihydrate 500mg
21829-25-4 硝苯地平標準品 Nifedipine 125mg
67035-22-7 硝苯地平硝苯吡啶同系物標準品 25mg
50428-14-3 硝苯地平亞硝基苯吡啶同系物標準品 25mg
66085-59-4 尼莫地平標準品 Nimodipine 125mg
70172-96-2 尼莫地平相關物質B標準品 50mg
85677-93-6 尼莫地平相關物質A標準品 50mg
139-13-9 氨基三乙酸標準品 Nitrilotriacetic Acid 50mg
55981-09-4 硝唑尼特標準品 Nitazoxanide 200mg
121-66-4 硝唑尼特相關物質A標準品 25mg
67-20-9 呋喃妥英標準品 Nitrofurantoin 500mg
59-87-0 呋喃西林標準品 Nitrofurazone 200mg
92-55-7 5-硝基糠醛二乙酸酯標準品
ELISA Kit 人溴脫氧核苷尿嘧啶
FSP(Human Fibroblast surface protein) ELISA Kit 人纖維母細胞表面抗原
SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor) ELISA Kit 人分泌性白細胞蛋白酶抑制因子
POMC(Human pro-opiomelanocortin) ELISA Kit 人阿黑皮素原
ADMA(Human asymmetrical dimethylarginine) ELISA Kit 人不對稱二甲基精氨酸
ST(Human Serotonin) ELISA Kit 人血清素/血清胺
CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit 人細胞毒素
Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit 人α突觸核蛋白
CA19-9(Human Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit 人糖鏈抗原19-9
HRD(Human Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素
Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit 人他克莫司
ESA(Human epithelial specific antigen) ELISA Kit 人上皮特異性抗原
EMA(Human Epithelial membrane antigen) ELISA Kit 人上皮膜抗原
CLU(Human clusterin) ELISA Kit 人凝聚素
OJ/IleRS(Human anti-OJ-antibody) ELISA Kit 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體
ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit 人抗著絲點抗體
MYOG(Human myogenin) ELISA Kit 人肌細胞生成素
ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素
Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit 人N端外顯肽
狗腎細胞;Super TubeC(Human secretory component) ELISA Kit 人分泌成分
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit 人二磷酸腺苷
PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit 人蛋白聚糖
PYD(Human Pyridinoline) ELISA Ki
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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