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細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞;CHO-HCV-NS5A
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 CHO-HCV-NS5A細胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因,能穩定表達NS5A蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
Flurandrenolide 100mg
1172-18-5 鹽酸氟西泮標準品 Flurazepam Hydrochloride CIV 200mg
氟西泮相關物質C標準品 Flurazepam Related Compound C 50mg
2886-65-9 氟西泮相關物質F標準品 Flurazepam Related Compound F 50mg
5104-49-4 氟比洛芬標準品 Flurbiprofen 200mg
6341-72-6 氟比洛芬相關物質A標準品 100mg
56767-76-1 氟比洛芬鈉標準品 Flurbiprofen Sodium 200mg
NA 氟替卡松丙酸酯相關物質混合物標準品 25mg
13311-84-7 氟他胺標準品 Flutamide 200mg
鄰-氟他胺標準品 o-Flutamide 50mg
80474-14-2 氟替卡松丙酸酯標準品 Fluticasone Propionate 100mg
氟替卡松丙酸酯分離度用混合物標準品 25mg
氟替卡松丙酸酯系統適用性用混合物標準品 25mg
61718-82-9 馬來酸氟伏沙明標準品 Fluvoxamine Maleate 200mg
NA 氟替卡松丙酸酯鼻噴劑分離度用混合物標準品 25mg
93957-55-2 氟伐他汀鈉標準品 Fluvastatin Sodium 350mg
氟伐他汀用于系統適用性標準品 25mg
129332-29-2 氟伐他汀鈉相
CD33抗體IgG
Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標記兔CD33L抗體IgG
Anti-CD34/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、兔、牛、豬、犬CD34抗體IgG
Anti-CD34(C-term) /FITC 熒光素標記CD34抗體(細胞表面的唾液粘蛋白)C端蛋白多肽IgG
Anti-Anti-CD44v10 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD44V10抗體IgG
Anti-CD34/PE 熒光素PE標記CD34抗體(細胞表面的唾液粘蛋白)IgG
Anti-CR1/CD35/FITC 熒光素標記Ⅰ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)IgG
Anti-CD36/FITC 熒光素標記CD36抗體IgG
Anti-CD38(human)/FITC 熒光素標記抗CD38抗體(人)IgG
Anti-CD38(mouse, rat)/FITC 熒光素標記抗CD38抗體(小鼠、大鼠)IgG
Anti-CD40L /FITC 熒光素標記抗CD40L抗體IgG
Anti-CD34/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記CD34抗體IgG
Anti-CD44/FITC 熒光素標記CD44抗體IgG
Anti-CD43/SPN/FITC 熒光素標記CD43抗體IgG
Anti-CD44/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記CD44抗體IgG
Anti-CD44v4 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD44V4抗體IgG
中國倉鼠卵巢細胞;CHO-HCV-NS5AAnti-CD44v5 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD44V5抗體IgG
Anti-CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標記抗CD44抗體IgG
Anti-CD44v7 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD44V7抗體IgG
Anti-CD45(LCA)/FITC 熒光素標記
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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