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細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞;CHO-HCV-p7
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 CHO-HCV-P7細胞整合有丙型肝炎病毒的P7基因,能穩定表達P7蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
mg
552-66-9 豆苷標準品 Daidzin 30mg
17230-88-5 達那唑標準品 Danazol 200mg
7261-97-4 丹曲林標準品 Dantrolene 200mg
24868-20-0 丹曲林鈉標準品 Dantrolene Sodium 100mg
301359-05-7 丹曲林相關物質A標準品 50mg
57268-33-4 丹曲林相關物質B標準品 50mg
7147-77-5 丹曲林相關物質C標準品 50mg
80-08-0 4,4'-二氨基二苯砜標準品 Dapsone 125mg
23541-50-6 鹽酸柔紅霉素標準品 Daunorubicin Hydrochloride 200mg
541-22-0 溴化十烴季胺標準品 Decamethonium Bromide 250mg
18507-89-6 癸氧喹酯標準品 Decoquinate 200mg
138-14-7 去鐵銨標準品 Deferoxamine Mesylate 500mg
520-45-6 脫氫乙酸標準品(酮式) Dehydroacetic Acid 200mg
鹽酸脫氫卡替洛爾標準品 Dehydrocarteolol Hydrochloride 100mg
81-23-2 去氫膽酸標準品 Dehydrocholic Acid 200mg
56-94-0 地美溴銨標準品 Demecarium Bromide 250mg
64-73-3 鹽酸地美環素標準品 200mg
86398-53-0 苯甲地那銨標準品 Denatonium Benzoate 200mg
264624-38-6 脫氧升麻烴標準品 23-EPI-26-Deoxyactein 20mg
154-17-6 D-2-脫氧葡萄糖標準品 2-Deoxy-D-Glucose (AS) 100mg
23515-45-9 鹽酸去乙酰地爾硫卓標準品 50mg
57041-67-5 地氟烷標準品 Desflurane 0.5ml
67429-44-1 地氟烷相關物質A標準品 0.1ml
58-28-6 鹽酸去甲咪嗪標準品 Desipramine Hydrochloride 125mg
17598-65-1 去乙酰毛花苷丙標準品 Deslanoside 100mg
24939-17-1 脫甲氧基姜黃素標準品 De
Anti-ARIP2a/FITC 熒光素標記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgG
Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgG
Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標記芳香化酶蛋白抗體IgG
Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標記芳香化酶/細胞色素P450/P450抗體IgG
Anti-ART/FITC 熒光素標記膠質細胞系源性神經營養因子GDNF的一種抗體IgG
Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 熒光素標記神經母細胞特異性轉移因子抗體IgG
Anti-ASIC1/BNaC2/FITC 熒光素標記酸敏感離子通道1抗體IgG
Anti-ASK1/MAPKKK5 /FITC 熒光素標記細胞凋亡信號調節激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗體IgG
Anti-ASK1(phospho Ser83) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體IgG
Anti-phospho-ASK1(Thr845) /FITC 熒光素標記兔抗人、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體IgG
Anti-ASK1(phospho Ser967) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體IgG
Anti-ASPP1/FITC 熒光素標記p53凋亡刺激蛋白1抗體IgG
Anti-ASPP2/FITC 熒光素標記P53凋亡刺激蛋白2抗體IgG
中國倉鼠卵巢細胞;CHO-HCV-p7Anti-AT/AGT /FITC 熒光素標記血管緊張素原抗體IgG
Anti-AT1/FITC 熒光素標記血管緊張素I抗體IgG
Anti-AT1R/FITC 熒光素標記血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體IgG
Anti-AT2R/FITC 熒光素標記血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體IgG
Anti-ATF1/FITC 熒光素標記活化復制因子1抗體IgG
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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