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細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞;CHO-HCV-E1
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 CHO-HCV-E1細胞整合有丙型肝炎病毒的E1基因,能穩定表達E1蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
oloid Mesylates 300mg
129-51-1 馬來酸麥角新堿標準品 100mg
57-87-4 麥角固醇標準品 Ergosterol 50mg
379-79-3 酒石酸麥標準品 150mg
639-81-6 麥角異胺標準品 Ergotaminine (List Chemical) 100mg
89-65-6 異抗壞血酸標準品 Erythorbic Acid 50mg
149-32-6 赤蘚糖醇標準品 Erythritol 200mg
114-07-8 紅霉素標準品 Erythromycin 250mg
527-75-3 紅霉素B標準品 Erythromycin B 100mg
1675-02-1 紅霉素C標準品 Erythromycin C 50mg
992-62-1 紅霉素相關物質N標準品 50mg
3521-62-8 *紅霉素標準品 Erythromycin Estolate 200mg
1264-62-6 琥乙紅霉素標準品 Erythromycin Ethylsuccinate 200mg
23067-13-2 葡庚糖酸紅霉素標準品 Erythromycin Gluceptate 200mg
3847-29-8 乳糖酸紅霉素標準品 Erythromycin Lactobionate 200mg
643-22-1 硬脂酸紅霉素標準品 Erythromycin Stearate 200mg
49746-10-3 四品熒光素鈉標準品 Erythrosine Sodium 100mg
11072-93-8 β-七葉素標準品 Escin 350mg
219861-08-2 草酸艾司西酞普蘭對照品標準品 Escitalopram Oxalate 200mg
128173-53-5 草酸艾司西酞普蘭雜質A對照品標準品 10mg
217087-09-7 埃索美拉唑鎂標準品 Esomeprazole Magnesium 10mg
50-28-2 雌二醇標準品 Estradiol 500mg
8抗體IgG
Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標記半胱氨酸蛋白酶8相關蛋白2抗體IgG
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標記白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標記白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG
Anti-Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG
Anti-Caspase-10/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶-10抗體IgG
Anti-Caspase-12(hunman)/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)IgG
Anti-Caspase-12/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgG
Anti-Caspase-13/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體IgG
Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG
Anti- Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC 熒光素標記α-連環蛋白抗體(α-α鏈接素)IgG
Anti- Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 熒光素標記 β-連環蛋白抗體IgG
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環素蛋白抗體IgG
anti-p- Beta catenin/FITC 熒光素標記磷酸化β-連環蛋白抗體IgG
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser45)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環素蛋白抗體IgG
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環素蛋白抗體IgG
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser675) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環素蛋白抗體IgG
中國倉鼠卵巢細胞;CHO-HCV-E1Anti-Phospho- Beta-Catenin (Thr41/Ser45) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環素蛋白抗體IgG
Anti- Gamma-Catenin/ Gamma-cats /FITC 熒光素標記γ-連環蛋白抗體(γ-γ鏈接素)IgG
anti-cath-B/CB/FITC 熒光素標記組織蛋白酶B
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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