細(xì)胞名稱 大鼠垂體瘤細(xì)胞；GH3

形態(tài)特性 上皮樣

生長特性 疏松貼壁，有漂浮的細(xì)胞簇

特征特性 GH3細(xì)胞系是由Tashjian AH等在1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細(xì)胞系不是直接來源于GH1細(xì)胞系的克隆，而是從原代培養(yǎng)的GH1細(xì)胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的。上皮樣的GH3細(xì)胞比GH1分泌更高水平的生長激素，也可產(chǎn)生催乳素。對(duì)調(diào)控GH3細(xì)胞分泌蛋白類激素的研究表明，可以刺激生長激素的分泌、抑制催乳素的產(chǎn)生。

培養(yǎng)條件 F10: Ham's F10 Nutrient Mixture 2.5%FBS+15%HS

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體 62~68

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

ers Mixture 15mg

阿巴卡韋立體異構(gòu)體混合物標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

34381-68-5 鹽酸醋丁洛爾標(biāo)準(zhǔn)品 Acebutolol Hydrochloride 125mg

40188-45-2 醋丁洛爾相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

152-72-7 醋硝香豆素標(biāo)準(zhǔn)品 Acenocoumarol 200mg

3598-37-6 乙酰丙嗪馬來酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Acepromazine Maleate 250mg

55589-62-3 安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)品 Acesulfame Potassium 200mg

103-90-2 對(duì)乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)品 Acetaminophen 400mg

2623-33-8 對(duì)乙酰氨基酚相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

N-乙酰對(duì)氨基酚相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

N-乙酰對(duì)氨基酚相關(guān)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

N-乙酰對(duì)氨基酚相關(guān)雜質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

N-乙酰對(duì)氨基酚相關(guān)雜質(zhì)J標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

103-84-4 乙酰苯胺標(biāo)準(zhǔn)品 500mg

59-66-5 乙酰唑胺標(biāo)準(zhǔn)品 Acetazolamide 2g

冰乙酸標(biāo)準(zhǔn)品 Glacial Acetic Acid 1.5ml×3ampules

968-81-0 醋磺環(huán)已脲標(biāo)準(zhǔn)品 Acetohexamide 250mg

546-88-3 乙酰氧肟酸標(biāo)準(zhǔn)品 Acetohydroxamic Acid 200mg

67-64-1 丙酮 Acetone 1.5ml×3ampules

5714-00-1 馬來酸醋標(biāo)準(zhǔn)品 Acetophenazine Maleate 200mg

53990-51-5 右丙氧芬相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

60-31-1 氯化乙酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)品 Acetylcholine Chloride 200mg

616-91-1 乙酰半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 Acetylcysteine 200mg

77-90-7 乙酰檸檬酸三丁酯標(biāo)準(zhǔn)品 Acetyltributyl Citrate 500mg

77-89-4 乙酰檸檬酸三乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Acetyltriethyl Citrate 500mg

537-55-3 N-乙酰-L-酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 N

41)  磷酸化蛋白激酶C α/β2抗體

Anti-PKC alpha  蛋白激酶C α抗體

Anti-PLCG 2/PLC gamma 2  磷酯酶Cγ2抗體

Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217)  磷酸化磷酯酶Cγ2抗體

Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759)  磷酸化磷酯酶Cγ2抗體

Anti-PLCG 1/PLC gamma 1  磷酯酶Cγ1抗體

Anti-Phospho-PLC gamma 1 （Tyr771）  磷酸化磷酯酶Cγ1抗體

Anti-Phospho-PLC gamma 1 （Ser1248）  磷酸化磷酯酶Cγ1抗體

Anti-Phospho-PLC gamma 1 （Tyr783）  磷酸化磷酯酶Cγ1抗體

Anti-PKC gamma/SCA14  蛋白激酶C亞型G抗體

Anti-Phospho-PKC gamma (Thr514)  磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體

Anti-Phospho-PKC gamma (Thr674)  磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體

Anti-PKC delta  蛋白激酶C亞性D型抗體

Anti-phospho-PKC delta (Tyr52)  磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體

Anti-phospho-PKC delta (Thr505)  磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體

Anti-phospho-PKC delta (Tyr311)  磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體

Anti-PLAU/uPA  尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體

Anti-PLAUR  尿激酶型纖溶酶原激活因子受體抗體

大鼠垂體瘤細(xì)胞；GH3Anti-PLG  纖維蛋白溶酶原抗體

Anti-Plexin A1  神經(jīng)叢蛋白A1抗體

Anti-Plexin A2  神經(jīng)叢蛋白A2抗體

Anti-Plexin B1  神經(jīng)叢蛋白B1抗體

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。