細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株；3D5

形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 陰性

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國(guó)藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

化型低密度脂蛋白受體抗體IgG

Anti-Lpin1 protein/FITC  熒光素標(biāo)記Lpin1 抗體IgG

Anti-Lpin1 protein/FITC  熒光素標(biāo)記Lpin1 抗體IgG

Anti-LPL/FITC  熒光素標(biāo)記脂蛋白脂酶抗體IgG

Anti-LPLUNC1/FITC  熒光素標(biāo)記人鼻咽癌癌基因抗體IgG

Anti-Lp-PLA2/FITC  熒光素標(biāo)記抗脂蛋白磷脂酶A2抗體IgG

Anti-LRIG1/FITC  熒光素標(biāo)記抗LRIG1抗體IgG

Anti-LRIG2/FITC  熒光素標(biāo)記抗LRIG2抗體IgG

Anti-LRIG3/FITC  熒光素標(biāo)記抗LRIG3抗體IgG

Anti-LRP/MVP /FITC  熒光素標(biāo)記肺耐藥相關(guān)蛋白抗體IgG

Anti-LRP1/CD91/FITC  熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白相關(guān)受體1抗體IgG

Anti-Phospho-LRP6 (Ser1490) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體IgG

Anti-LRP6/FITC  熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體IgG

Anti-LRRC4/FITC  熒光素標(biāo)記腦瘤相關(guān)基因抗體IgG

Anti-LRRK2 /FITC  熒光素標(biāo)記富亮氨酸重復(fù)激酶2抗體IgG

Anti-LTB4/Leukotriene B4/FITC  熒光素標(biāo)記白三烯B4抗體IgG

Anti-LTB4-R1/LTB4R/FITC  熒光素標(biāo)記白三烯B4受體1抗體IgG

Anti-LTB4-R2/FITC  熒光素標(biāo)記白三烯B4受體2抗體IgG

Anti-Lxn(Latexin)/FITC  熒光素標(biāo)記羧肽酶抑制劑抗體IgG

Anti-ATEXPA10 /FITC  熒光素標(biāo)記 植物延長(zhǎng)蛋白（擬南芥）IgG

Anti-Ly-6G/FITC  熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞抗原6G抗體IgG

Anti-LY-86/MD-1/FITC  熒光素標(biāo)記MD-1蛋白抗體IgG

Anti-LY-96/MD-2/ESOP-1/FITC  熒光素標(biāo)記MD-2蛋白抗體IgG

Anti-Lysozyme/FITC  熒光素標(biāo)記溶菌酶抗體IgG

Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) /FITC  熒光素標(biāo)記膜

原花青素B1 PROCYANIDIN B1 ≥95%

原花青素B2 Procyanidin B2 ≥95%

原花青素B3 Procyanidin B3 ≥90%

原人參二醇（PPD） Protopanaxdiol ≥95%

原人參三醇(PPT) PROTOPANAXATRIOL ≥98%

原薯蕷皂苷 Protodioscin ≥98%

原蘇木素B Protosappanin B ≥97%

原偽金絲桃素 Protopseudohypericin ≥95%

遠(yuǎn)志山酮III Polygalaxanthone III ≥97%

遠(yuǎn)志酸 Polygalacic Acid ≥97%

遠(yuǎn)志皂苷元 Senegenin ≥96%

蕓香柚皮苷 Narirutin ≥98%

澤蘭黃酮 Nepetin >98%

澤瀉醇B-23-醋酸酯 AlisolB-23-acetate ≥97%

獐芽菜苷 Sweroside 98%

獐芽菜苦苷 Swertiamarin ≥98%

芝麻酚 Sesamol 99%

芝麻素 Sesamin ≥98%

知母皂苷A-Ⅲ Timosaponin A-Ⅲ ≥98%

知母皂苷BⅡ anemarsaponin B 97%

酯蟾毒配基 Resibufogenin ≥98%

重樓皂苷I Chonglou saponin I ≥94%

重樓皂苷II Polyphyllin II 92%

竹葉香附素A Raddeanin(Anemodeanin) A 98%

梓醇 Catalpol ≥98%

紫草酸 lithospermic acid 96%

紫丁香苷 Syringin 95%

紫花前胡素 DECURSIN ≥97%

紫堇靈 Corynoline ≥98%

紫杉醇 Paclitaxel ≥98%

紫杉葉素 (+)-Taxifolin ≥95%

小鼠雜交瘤細(xì)胞株；3D5紫菀酮 Shionone 97%

紫云英苷 ASTRAGALIN ≥98%

棕櫚酸 Palmic acid ≥97%

"總銀杏酸

(C13:0,C15:1,C17:1)" "Ginkgolic Ac

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。