細(xì)胞名稱 小鼠抗人雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgA-495

形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性 半貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次

傳代情況

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

0703-200726

1ml 水楊酸甲酯 含量測(cè)定 常溫，避光 110707-201011

0.5ml 桂皮醛 含量測(cè)定 -20℃，避光 110710-201016

20mg 鹽酸水蘇堿 含量測(cè)定 常溫，避光 110712-201010

20mg 靛玉紅 含量測(cè)定 常溫，避光 110717-200204

20mg 酯蟾毒配基 含量測(cè)定 常溫，避光 110718-200507

100mg 薄荷腦 含量測(cè)定 常溫，避光 110728-200506

100mg 甘氨酸 鑒別 常溫，避光 110735-200102

200mg 冰片 含量測(cè)定 常溫，避光 110743-200905

20mg 菝契皂苷元 含量測(cè)定 常溫，避光 110744-200509

20mg 馬兜鈴酸A TLC檢查 常溫，避光 110746-200507

100mg 樟腦 含量測(cè)定 常溫，避光 110747-200507

20mg 熊去氧膽酸 含量測(cè)定 常溫，避光 110755-9003

0.2ml 乙酸龍腦酯 含量測(cè)定 常溫，避光 110759-200604

20mg 山姜素 含量測(cè)定 常溫，避光 110762-200303

20mg 小豆蔻明 含量測(cè)定 常溫，避光 110763-200302

20mg 左旋紫草素 鑒別 常溫，避光 110769-200405

50mg 香草酸 含量測(cè)定 常溫，避光 110776-200402

20mg 斑蟊素 含量測(cè)定 常溫，避光 110783-200604

20mg 槐定堿 鑒別 常溫，避光 110784-200303

0.1ml 桉油精 含量測(cè)定 常溫，避光 110788-201004

0.1ml 檀香油 鑒別 常溫，避光 110789-200005

20mg 4-甲氧基 含量測(cè)定 常溫，避光 110790-200202

100mg 對(duì)二甲氨基苯 內(nèi)標(biāo)無含測(cè) 常溫，避光 110791-9102

20mg 土大黃苷 鑒別 常溫，避光 110794-200504

Littman 瓊脂 250

用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)(Acumedia方法) DICHLORANGLYCEROL (DG-18) AGAR DG-18瓊脂 250

用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) YM Agar YM瓊脂 250

濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法) YM11 Agar YM11瓊脂 250

用于霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(Merck方法) OGY Agar OGY瓊脂 250

用于啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細(xì)菌的計(jì)數(shù) WL Nutrient Agar WL營養(yǎng)瓊脂 250

用于真菌檢測(cè) Sabouraud’s Agar，Modified 改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基    250

用于真菌檢測(cè)(Acumedia 方法) Sabouraud BHI Agar 沙氏BHI瓊脂 250

用于四環(huán)素檢定中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Strain Medium(for B.Cereus) 菌種培養(yǎng)基      250

用于四環(huán)素殘留的微生物學(xué)檢定(SN標(biāo)準(zhǔn)) Tetracyline Examination Agar 四環(huán)素檢定瓊脂    250

用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Glucose Tryptone Agar 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250

用于彎曲桿菌分離(SN標(biāo)準(zhǔn)) Brucella Agar 布氏瓊脂    250

用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標(biāo)準(zhǔn)) Brucella Broth 布氏肉湯    250

用于空腸彎曲菌的分離培養(yǎng)(SN 、GB標(biāo)準(zhǔn)) Skirrow Agar Base,Modified 改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)    250

用于彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Camp-BAP Agar Base,Modified 改良Camp-BAP氏瓊脂基礎(chǔ) 250

用于彎曲桿菌的TTC試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)） TTC Agar Base TTC 瓊脂基礎(chǔ)          250

用于彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)） Glycine Medium 甘氨酸培養(yǎng)基        250

用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)） H2S Test Medium 快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂    250

用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)） Dnase Agar Base with Methyl Green DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)    100

用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 馬尿酸鈉培養(yǎng)基 100

用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂 250

用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)(Merck方法) Bolton Selective Enrichment broth 波爾頓選擇性增菌肉湯 250

小鼠抗人雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgA-495用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法) CCDA Base CCDA基礎(chǔ) 250

每支添加于200mlCCDA基礎(chǔ)中 CCDA Supplement CCDA添加劑 2ml*10支

用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法) Campy-Cefex Agar Base Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ) 250

每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ)中 Campy-Cefex Suppleme

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。