細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞；3G4

形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

生長特性 半貼壁生長

特征特性 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況 C5

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標準） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應用于細菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

B Enrichment Broth EB增菌液 250

用于李氏菌的增菌培養(yǎng)（MERCK標準） Fraser Medium Fraser 培養(yǎng)基 250

添加到HB4193中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng) Fraser Supplement Fraser 添加劑 5ml*2支

用于李氏菌的增菌培養(yǎng)（MERCK標準） UVM Medium UVM培養(yǎng)基 250

添加到HB4195中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng) UVM Supplement1 UVM 添加劑1 1ml*10支

用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離（NEOGEN標準） LM-137 Agar LM-137瓊脂 250

用于啤酒中厭氧菌檢測 UBA　Medium UBA　培養(yǎng)基 250

用于啤酒中厭氧菌檢測 NBB　Agar NBB　培養(yǎng)基 250

用于啤酒中乳酸菌檢測和分離培養(yǎng) Raka-Ray Medium Raka-Ray 培養(yǎng)基 250

用于化妝品樣品制備，前增菌培養(yǎng)（GB標準） Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth SCDLP液體培養(yǎng)基  250

用于化妝品細菌總數(shù)測定（GB標準） Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂  250

用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標準） Acetamide Agar 乙酰胺瓊脂    250

用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標準） Cetrimide Agar 十六烷*基溴化銨瓊脂  250

生化試驗培養(yǎng)基，用于細菌（如金黃色葡萄球菌）甘露醇發(fā)酵試驗（GB標準） Mannitol Medium 甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基  250

生化試驗培養(yǎng)基，用于細菌明膠液化試驗（GB標準） Gelatin Medium Base 明膠培養(yǎng)基基礎  250

用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗（GB標準） King Medium A 綠膿菌素測定培養(yǎng)基(PDP)    250

用于化妝品中糞大腸菌群的測定（GB標準） Lactose Bile Medium 乳糖膽鹽培養(yǎng)基    250

用于化妝品中細菌總數(shù)測定（GB標準） TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar TTC卵磷脂-吐溫80-營養(yǎng)瓊脂    250

用于化妝品中霉菌總數(shù)測定(Acumedia 方法) HC Agar Base HC瓊脂基礎 250

用于化妝品中微生物檢測(Acumedia 方法) LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 改良LETHEEN瓊脂基礎 250

用于化妝品和微生物檢測(Acumedia方法) TAT Broth TAT肉湯 250

用于生物制品霉菌無菌試驗（GB標準） Fungi Medium 真菌培養(yǎng)基 250

用于測定酵母菌總數(shù)（GB標準） Yeast Peptone Dextrose Agar YPD瓊脂  250

用于鏈霉素，卡那霉素，慶大霉素，紅霉素等效價測定 Antibiotic Agar 抗生素檢定培養(yǎng)基1號（高PH）  250

用于磺芐青霉素效價測定 Antibiotic Agar 抗

計數(shù) WL Nutrient Agar WL營養(yǎng)瓊脂 250

用于真菌檢測 Sabouraud’s Agar，Modified 改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基    250

用于真菌檢測(Acumedia 方法) Sabouraud BHI Agar 沙氏BHI瓊脂 250

用于四環(huán)素檢定中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(SN標準) Strain Medium(for B.Cereus) 菌種培養(yǎng)基      250

用于四環(huán)素殘留的微生物學檢定(SN標準) Tetracyline Examination Agar 四環(huán)素檢定瓊脂    250

用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)(SN標準) Glucose Tryptone Agar 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250

用于彎曲桿菌分離(SN標準) Brucella Agar 布氏瓊脂    250

用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標準) Brucella Broth 布氏肉湯    250

用于空腸彎曲菌的分離培養(yǎng)(SN 、GB標準) Skirrow Agar Base,Modified 改良Skirrow氏瓊脂基礎    250

用于彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)(GB標準) Camp-BAP Agar Base,Modified 改良Camp-BAP氏瓊脂基礎 250

用于彎曲桿菌的TTC試驗（GB標準） TTC Agar Base TTC 瓊脂基礎          250

用于彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗（GB標準） Glycine Medium 甘氨酸培養(yǎng)基        250

用于彎曲桿菌的硫化氫試驗（GB標準） H2S Test Medium 快速硫化氫試驗瓊脂    250

用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗（GB標準） Dnase Agar Base with Methyl Green DNA酶甲基綠瓊脂基礎    100

用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗（GB標準） 馬尿酸鈉培養(yǎng)基 100

用于彎曲桿菌的硫化氫試驗（GB標準） 快速硫化氫(H2S)試驗瓊脂 250

用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)(Merck方法) Bolton Selective Enrichment broth 波爾頓選擇性增菌肉湯 250

用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法) CCDA Base CCDA基礎 250

每支添加于200mlCCDA基礎中 CCDA Supplement CCDA添加劑 2ml*10支

用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法) Campy-Cefex Agar Base Campy-Cefex 瓊脂基礎 250

每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎中 Campy-Cefex Supplement Campy-Cefex 添加劑 2ml*10

用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(shù)（GB.SN標準） Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 甘露小鼠雜交瘤細胞；3G4醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎（MYP） 250

用于蠟樣芽孢桿菌的MPN值測定 (SN標準) Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎  250

用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(SN標準)

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉化效率)。
4. 37℃，225 rpm復蘇60分鐘或30℃，225 rpm復蘇90分鐘。
(當質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉化control pUC19計算轉化效率，則需37℃，225 rpm復蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。