本公司專業(yè)代理ATCC細(xì)胞，提供售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì) 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；L Wnt-3A的說明書或價(jià)格信息，請咨詢在線客服。

細(xì)胞名稱 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；L Wnt-3A

形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞

生長特性 貼壁生長

特征特性 L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。 Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。 這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。 它們是目前Wnt-3A條件培養(yǎng)基的來源。 由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來源細(xì)胞株(ATCC CRL-2648)作對照。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；0.4 mg/ml G-418

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況 PN5

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

細(xì)胞種類
凍存
對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn)，并可減緩冷卻速度嗎，大大降低冰晶形成的危險(xiǎn)  (冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注：DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí)，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。 
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來之用時(shí)，必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣，我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明，以便獲得結(jié)果。 
1）在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。 
2）細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3）必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4）將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲存；溫度高于 -50°C 時(shí)，冷凍的細(xì)胞將開始變質(zhì)。 
5）必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存 
6）必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備。 
7）所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù)，并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。

凍存培養(yǎng)基
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

100mg 萘丁美酮 HPLC法含量測定 常溫，避光 101003-200801

100mg 普羅雌烯 含量測定 常溫，避光 101004-200801

100mg 利可君 含量測定 常溫，避光 101006-200701

50mg R-甲磺酸羅哌卡因 檢查用 2-8℃，避光 101008-200701

100mg 鹽酸班布特羅 含量測定 常溫，避光 101009-200701

100mg 哌喹 含量測定 常溫，避光 101010-200701

100mg N-乙酰氨基葡萄糖 HPLC法含量測定 常溫，避光 101011-200801

100mg 去甲斑蝥酸鈉 IR鑒別用 常溫，避光 101013-200701

100mg 佐尼沙胺 含量測定 常溫，避光 101014-200801

100mg 奧美拉唑鎂 含量測定 常溫，避光 101015-200801

100mg 米氮平 含量測定 常溫，避光 101016-200801

100mg 托吡卡胺 含量測定 常溫，避光 101019-200801

50mg 尼群地平雜質(zhì)A 檢查用 常溫，避光 101020-200801

100mg 瑞舒伐他汀鈣 含量測定 常溫，避光 101028-201001

100mg 奧拉西坦 供檢查用 常溫，避光 101032-200901

100mg 鹽酸貝凡洛爾 含量測定 常溫，避光 101033-200901

100mg 鹽酸布比卡因 含量測定 常溫，避光 101034-200801

500mg 丁苯酞 含量測定 常溫，避光 101035-200901

50mg 2-氨基-4-氯苯酚 供TLC檢查用 常溫，避光 101038-200901

50mg 品 海醇雜質(zhì)I 供UV檢查用 常溫，避光 101039-201001

50mg 品 海醇雜質(zhì)Ⅲ HPLC系統(tǒng) 常溫，避光 101040-201001

100mg 左卡尼汀 含量測定 常溫，避光 101041-200901

100mg 雙環(huán)醇 含量測定 常溫，避光 101044-201001

100mg 甲異靛 UV法含量測定 常溫，避光 101055-201001

100mg 卡比多巴 HPLC法含量測定 常溫，避光 101056-201001

100mg 氯氧喹 含量測定 常溫，避光 101058-200901

MAG; )  髓鞘相關(guān)糖蛋白-a(抗原)

MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1)  基質(zhì)金屬蛋白酶-1（小鼠抗原）

midnolin isoform Protein 1  中腦核仁蛋白1（抗原）

midnolin isoform Protein 2  中腦核仁蛋白2（抗原）

MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A)  一種細(xì)胞應(yīng)激分子抗原

MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3)  多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原)

MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1)  多藥耐藥相關(guān)蛋白1(抗原)

LRP/MVP (Lung resistance related protein)  肺耐藥相關(guān)蛋白(抗原)

MSLN(mesothelin)  間皮素(多肽抗原)

MSH2 (mutS homolog 2)  MSH2抗原

NKR(Neuromedin B Receptor)  神經(jīng)激肽B受體（抗原）

NF-L(Neurofilament triplet L)  低分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）

NF-M (Neurofilament triplet M)  中分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）

NF-H(Neurofilament triplet H)  高分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)

NIS(Na+/I-symporter;NIS)  鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白（多肽抗原）

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB)  細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)

NR2A (Glutamate receptor2A)  谷氨酸受體（N端抗原）

NRP-1(neuropilin-1)  神經(jīng)纖毛蛋白-1(抗原)

NRP-2(neuropilin-2)  神經(jīng)纖毛蛋白-2（抗原）

NSBP1(Nucleosome-binding protein 1)  核小體結(jié)合蛋白1(抗原)

NTP，Neurual thread protein  神經(jīng)絲蛋白（抗原）

小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；L Wnt-3AOAT-1 (Organic anion transporter 1)human  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源）

OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1（大、小鼠同源：人源見bs-0606P）

OAT-3(Organic anion transporter 3)  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3(抗原