細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；Lsc-035

形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 可產(chǎn)生抗人小細(xì)胞肺癌的單克隆抗體。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS

傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況 PN

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

Licochalcone A HPLC≥98%

58749-23-8 甘草查爾酮B Licochalcone B HPLC≥98%

144506-14-9 甘草查爾酮C Licochalcone C HPLC≥98%

蓮心堿高氯酸鹽 Liensinine Perchlorate HPLC≥98%

2586-96-1 蓮心堿 Liensinine HPLC≥98%

78-70-6 芳樟醇 Linalool HPLC≥98%

6681-18-1 木蘭花堿 Magnoflorine chloride HPLC≥98%

11013-97-1 甲基橙皮苷 Methyl hesperidin HPLC≥98%

54522-52-0 甲基原薯蕷皂苷 Methyl protodioscin HPLC≥98%

丹參酚酸B甲酯 Monomethyl lithospermate B HPLC≥98%

62596-29-6 桑辛素 Morusin HPLC≥98%

102841-42-9 桑皮苷A Mulberroside A HPLC≥98%

102841-43-0 桑皮苷C Mulberroside C HPLC≥98%

551-08-6 丁烯基苯酞 3-Butylidenephthalide HPLC≥98%

2292-16-2 甲基蓮心堿 Neferine HPLC≥98%

27215-14-1 新穿心蓮內(nèi)酯 Neoandrographolide HPLC≥98%

39011-91-1 氧化芍藥苷 Oxypaeoniflorin HPLC≥98%

29070-92-6 茯苓酸 Pachymic acid HPLC≥98%

55954-61-5 偽金絲桃素 假金絲桃素 Pseudohypericin HPLC≥98%

113443-70-2 大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside HPLC≥98%

80651-76-9 桑根酮C Sanggenone C HPLC≥98%

62006-39-7 洋川芎內(nèi)酯A Senkyunolide A HPLC≥98%

94596-27-7 洋川芎內(nèi)酯H Senkyunolide H HPLC≥98%

94596-28-8 洋川芎內(nèi)酯I Senkyunolide I HPLC≥98%

641-12-3 番瀉苷元A 番瀉甙元A Sennidin A HPLC

因子受體4抗原

CCR-6/CD196 peptide  細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原

CXCR6(CXC-chemokine receptor 6) peptide  細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原

CCR-7(CC chemokine receptor 7)  CC趨化因子受體7（多肽）

CXCL10/IP-10  CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原

VEGF(Vascular endothelial growth factor)  血管內(nèi)皮生長因子（多肽抗原）

CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase)  CD10抗原

ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1)  ZCWCC1抗原

CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor  CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原

CD138/Syndecan-1  多配體蛋白聚糖1抗原

CD146/MCAM  黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原

ANPEN/CD13(Aminopeptidase N)  氨肽酶N抗原

CD14(cluster of differentiation antigen 14)  CD14/內(nèi)毒素受體抗原

CD28  CD28抗原

CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule)  活化白細(xì)胞粘附分子抗原

CD177/NB1 peptide  嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原

CD24  CD24抗原

CD24  CD24抗原

CD2AP (CD2-associated protein)  白細(xì)胞分化抗原CD2AP

CD33 peptide(human)  CD33抗原（人）

CD33/Siglec-3(mouse ret)  CD33抗原(大、小鼠）

CD34  CD34抗原（細(xì)胞表面的唾液粘蛋白）

小鼠雜交瘤細(xì)胞；Lsc-035CD38(mouse, rat)  CD38多肽（小鼠、大鼠）

CD38(human)  CD38抗原（人）

CD36  CD36（多肽）

CD7  CD7抗原

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。