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細胞名稱 人紅白血病細胞;Kasumi-1
形態特性 原粒細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 這是一個帶有8:21號染色體轉位的白血病細胞株。 這個轉位使得AML1基因和ETO (或稱 MTG8)基因串聯,使融合基因AML1-ETO (也稱作 AML1-MTG或 RUNX1-CBF2T1)的表達升高,因而細胞產生嵌合的AML1-ETO蛋白。 這個蛋白下調CEBPA mRNA,蛋白和DNA的結合活性,而這種結合對粒性白細胞的分化是重要的。 這株細胞建立于一位急性白血病患者的外周血。 這株細胞髓過氧化物酶陽性,顯示其髓性成熟的形態。 增生試驗顯示,培養的細胞對IL-3、IL-6、G-CSF(粒細胞
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,20%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
光素標記人巨細胞病毒PP65/CMV低基質磷脂蛋白抗體IgG
Anti-HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒UL23抗體IgG
Anti-HCMV UL49/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒UL49抗體IgG
Anti-HCN4/FITC 熒光素標記環化核苷酸調控陽離子通道蛋白亞型4IgG
Anti-HCV-Core/FITC 熒光素標記丙型肝炎病毒-C區抗體IgG
Anti-HCV-HCBP1/ACY-3 /FITC 熒光素標記丙型肝炎病毒核心蛋白結合蛋白-1抗體IgG
Anti-HCV-NS1/FITC 熒光素標記丙型肝炎病毒-NS1抗體IgG
Anti-HCV-NS3/FITC 熒光素標記丙型肝炎病毒-NS3抗體IgG
Anti-HCV-NS4a/FITC 熒光素標記丙型肝炎病毒-NS4a抗體IgG
Anti-HDAC1/HD1/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶1抗體IgG
Anti-HDAC2/HD2/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶2抗體IgG
Anti-HDAC3/HD3/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶3抗體IgG
Anti-HDAC4/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶4抗體IgG
Anti-Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)/FITC 熒光素標記磷酸化組蛋白去乙酰化酶4、5、7抗體IgG
Anti-Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) /FITC 熒光素標記磷酸化組蛋白去乙酰化酶4、5、7抗體IgG
Anti-HDAC5/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶5抗體IgG
Anti-HDAC6/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶6抗體IgG
Anti-phospho-HDAC6 (Ser22) /FITC 熒光素標記磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體IgG
Anti-HDAC7/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰
301
3.0g 山香圓葉 TLC法鑒別 121230-0301
1.0g 臭靈丹 TLC法鑒別 121231-200301
0.5g 波棱瓜子 TLC法鑒別 121233-200301
2.0g 夜香牛 TLC法鑒別 121234-200301
1.3g 山風 TLC法鑒別 121235-200301
1.0g 船形烏頭 TLC法鑒別 121236-200401
25g 柘木 TLC法鑒別 121237-200603
2g 甜葉菊 TLC法鑒別 121238-200603
5g 地稔 TLC法鑒別 121239-200502
1g 檀香 TLC法鑒別 121240-
1.0g 毛大丁草 TLC法鑒別 121241-200401
0.5g 兔耳草 TLC法鑒別 121242-200401
3.0g 祖師麻 TLC法鑒別 121243-200301
1.0g 蜜環菌粉 TLC法鑒別 121244-200301
1.0g 紅穿破石 TLC法鑒別 121245-200301
1.0g 海星 TLC法鑒別 121246-0301
5g 山綠茶 TLC法鑒別 121247-200502
人紅白血病細胞;Kasumi-11g 廣金錢草 TLC法鑒別 121248-200703
1.4g 大黃(掌葉大黃) TLC法鑒別 121249-200402
0.5g 沒藥(膠質沒藥) TLC法鑒別 121250-200503
2.0g 青風藤 TLC法鑒別 121251-0301
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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