細(xì)胞名稱 人子宮頸表皮癌細(xì)胞；ME-180

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 這株細(xì)胞來(lái)源于一個(gè)細(xì)胞集落不規(guī)則沒(méi)有顯著角質(zhì)化的侵染性鱗狀細(xì)胞癌。 單層培養(yǎng)的細(xì)胞間可以觀察到帶狀連接，也注意到有細(xì)胞質(zhì)張力絲。 1970年發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。 腫瘤壞死因子(TNF)α抑制ME-180的生長(zhǎng)。 這株細(xì)胞含有人瘤病毒(HPV)DNA，與HPV-39的同源性高于HPV-18。

培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況 P(126+5)

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測(cè) 陰性

STR Amelogenin:X；CSF1PO:11；D13S317:11,13；D16S539:12,13；D18S51:12；D19S433:13,15.2；D21S11:30,31；D2S1338:18；D3S1358:16；D5S818:12；D7S820:9,10；D8S1179:14；FGA:23；TH01:8,9.3；TPOX:8,10；vWA:15,17

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國(guó)藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

Anti-Tbx21/T-bet  T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體

Anti-TBX18  轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體

Anti-TCF7L2  轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體

Anti-TCTP  翻譯控制腫瘤蛋白抗體

Anti-Phospho-TCTP (Ser46)  磷酸化翻譯控制腫瘤蛋白抗體

Anti-TDP-43  Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體

Anti-PHLDA1/TDAG51  T淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體

Anti-TEM 1/CD248  內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體

Anti-TEM8  腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體

Anti-TERT  端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體

Anti-TETRODOTOXIN ( TTX )  河素抗體

Anti-TP-1/TEP1  端粒酶相關(guān)蛋白1抗體

Anti-Tetraspan5  四分子交聯(lián)體5抗體

Anti-TFF2  三葉肽因子2抗體

Anti-TFF3  三葉肽因子3抗體

Anti-TIF1 Alpha/TRIM24  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體

Anti-TIF1 beta/KAP1  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體

Anti-Phospho-TIF1beta (Ser824)  磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體

Anti-TIF1 gamma/Trim33  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體

Anti-Tissue factor  組織因子抗體

20mg/支 延胡索乙素 Tetrahydropalmatine

20mg/支 羊藿苷 Icariin 489-32-7

20mg/支 柚皮苷 Naringin 10236-47-2

20mg/支 柚皮素 Naringenin 480-41-1

20mg/支 巖白菜素 Bergenin 477-90-7

鹽酸青藤堿

20mg/支 小檗堿 Berberine 黃連素堿 2086-83-1

20mg/支 黃連堿 Coptisine 3486-66-6

20mg/支 鹽酸黃連堿 Coptisine chloride 氯化黃連堿 6020-18-4

20mg/支 胡黃連苷I Picroside I 胡黃連苦苷I 27409-30-9

20mg/支 胡黃連苷II Picroside II 胡黃連苦苷II 39012-20-9

10mg/支 胡黃連苷III Picroside III 胡黃連苦苷III 64461-95-6

20mg/支 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯 (−)-Epigallocatechin gallate EGCG 989-51-5

20mg/支 表兒茶素沒(méi)食子酸酯 (−)-Epicatechin gallate ECG 1257-08-5

20mg/支 表沒(méi)食子兒茶素 (−)-Epigallocatechin EGC 970-74-1

20mg/支 沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯 (−)-Gallocatechin gallate GCG 4233-96-9

20mg/支 銀杏內(nèi)酯A Ginkgolide A 15291-75-5

20mg/支 銀杏內(nèi)酯B Ginkgolide B 15291-77-7

20mg/支 銀杏內(nèi)酯C Ginkgolide C 15291-76-6

20mg/支 白果內(nèi)酯 (−)-Bilobalide 銀杏內(nèi)酯BB 33570-04-6

20mg/支 斑蝥素 Cantharidin 56-25-7

20mg/支 去甲斑蝥素 Norcantharidin 1294030

 人子宮頸表皮癌細(xì)胞；ME-18020mg/支 龍膽苦苷 Gentiopicroside 20831-76-9

20mg/支 膽酸 Cholic acid 81-25-4

20mg/支 芝麻素 Sesamin 607-80-7

20mg/支 芝麻林素 Sesamolin 526-07-

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。