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A172(膠質母細胞瘤細胞)
【細胞復蘇的方法】:
(l)從液氮中取出冷凍管,迅速投入37~42℃水浴中,晃動,使其盡快融化(1分鐘左右)。
(2)用培養液稀釋至原體積的10倍以上,直接培養。
(3)或低速離心,去上清,加新鮮培養液培養。
細胞計數要點:
1.進行細胞計數時,要求懸液中細胞數目不低于104個/ml,如果細胞數目很少要進行離心再懸浮于少量培養液中;
2.要求細胞懸液中的細胞分散良好,否則影響計數準確性。
3.取樣計數前,應充分混勻細胞懸液,尤其時多次取樣計數時更要注意每次取樣都 要混勻,以求計數準確;
4. 數細胞的原則是只數完整的細胞,若細胞聚集成團時,只按照一個細胞計算。如果細胞壓在格線上時,則只計上線,不計下線,只計右線,不計左線。
5. 操作時,注意蓋片下不能有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中,否則要重新計數。
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初學者易犯的錯誤:
1. 計數前未將待測懸液吹打均勻。
2. 滴入細胞懸液時蓋玻片下出現氣泡。
3. 滴入懸液時的量太多,至使細胞懸液流入旁邊的槽中。
本實驗特殊試劑的配制:4%臺盼藍母液:稱取 4克臺盼藍,加入少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至 100 毫升,用濾紙過濾,4℃保存。
使用液:使用時,用 PBS稀釋母液至 0.4%即可。
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Campy-Cefex 添加劑 Campy-Cefex Supplement 每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎中
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