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HT-29(結腸癌細胞)
【細胞復蘇的方法】:
(l)從液氮中取出冷凍管,迅速投入37~42℃水浴中,晃動,使其盡快融化(1分鐘左右)。
(2)用培養液稀釋至原體積的10倍以上,直接培養。
(3)或低速離心,去上清,加新鮮培養液培養。
迅速解凍:迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。約 1-2min后凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心 3min
制備細胞懸液:
1.吸棄上清液。
2.向離心管內加入 10ml 培養液,吹打制成細胞懸液。
細胞計數:細胞濃度以 5×105/ml 為宜。
培養細胞 :將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內 ,將培養瓶放入37℃和5%CO2的培養箱內2-4小時(或者 24-48 小時)后換液繼續培養培養,換液的時間由細胞情況而定。
細胞的相關產品如下:
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初學者易犯錯誤:
1 水浴鍋未預熱或者未預熱到 37℃。
2.水浴鍋內凍存管太多,導致傳熱不佳,使融化時間延長。
3.離心前忘記平衡,導致離心機損壞和細胞丟失。
4.一次復蘇細胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導致細胞交叉污染。
細胞計數實驗原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞數目,即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。
準備工作:取一瓶傳代的細胞,按照《傳代細胞培養(消化法)》中的傳代方法繁殖細胞,待 長成單層后以被使用。
公司其他生物培養基產品有:
腸毒素產毒培養基 Bowel poison produce toxic medium 用于金黃色葡萄球菌腸毒素產毒試驗
亞碲酸鈉肉湯培養基基礎 Sodium lurite Broth Base 用于金黃色葡萄球菌的增菌培養。每100ml培養基需另加入1%亞碲酸鈉1ml
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北沙參亞碲酸鈉胨水培養基基礎 Beisachang Sodium lurite Broth Base 用于金黃色葡萄球菌的增菌培養。每100ml培養基需另加入1%亞碲酸鈉0.2ml
葡萄球菌選擇性瓊脂110(CHAPMAN 瓊脂) Staphylococcus Selective Agar 10 用于金黃色葡萄球菌的分離培養
甘露醇卵黃培養基基礎 Egg-Yolk Mannitol Salt agar Base 用于金黃色葡萄球菌的分離培養(Japan方法)
V-J瓊脂 Vogel-Johnson Agar 病源標本和其它標本中甘露醇陽性金黃色葡萄球菌的選擇性分離(Merck方法)
改良Giolitti-Cantobi 肉湯 Modified Giolitti-Cantoni Broth 用于金黃色葡萄球菌的增菌培養
甘露醇高鹽瓊脂 Manitol Salt Agar 用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養
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