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THP-1(單核細胞白血病)
【細胞復蘇的方法】:
(l)從液氮中取出冷凍管,迅速投入37~42℃水浴中,晃動,使其盡快融化(1分鐘左右)。
(2)用培養(yǎng)液稀釋至原體積的10倍以上,直接培養(yǎng)。
(3)或低速離心,去上清,加新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。
Ⅰ型膠原酶:0.1%Ⅰ型膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配制和消毒滅菌。注意:因為Ⅰ型膠原酶分子顆粒比胰酶大,不容易過濾,因此可以用蔡式濾器過濾除菌。分裝入 10ml 小瓶-20℃保存。
明膠溶液:因為明膠難于過濾,所以配制 0.1%明膠溶液必須用無菌的 PBS配制。所以制備過程中必須要注意無菌操作。首要的問題是如何無菌準確稱量0.1 克(配成100ml 溶液)—即解決無菌分裝藥品的問題。其次要注意即使是 01.的溶液,明膠也難溶,因此要充分搖勻,過夜放置,然后無菌分裝入 50ml 小瓶中, 4℃保存。
細胞的相關產品如下:
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20ug/ml內皮生長因子注意事項:
1.配制溶液時必須用新鮮的蒸餾水。
2.安裝蔡式濾器時通常使用孔徑0.45微米 和0.22微米濾膜各一張 ,放置位置為0.45的位于0.22微米的濾膜上方,并且要特別注意濾膜光面朝上。
3.配制RPMI1640培養(yǎng)基時因為還要加入小牛血清,而小牛血清略偏酸性,為了保證培養(yǎng)液 PH值zui終為 7.2,可在配制時調 PH至 7.4。
公司其他生物培養(yǎng)基產品有:
GN 增菌液 Gram Negative Enrichment Broth 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標準)
XLD 培養(yǎng)基 Xylose Lysine Desoxycholate Medium 選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門氏菌(FDA標準)
WS 瓊脂 WS Salmonella Agar 用于沙門氏菌的選擇性分離(GB標準)
葡萄糖銨培養(yǎng)基 Ammonium Dextrose Medium 用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(GB標準)
動力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 用于細菌的復合生化試驗
亞硒酸鹽增菌液(SF) Selenite Enrichment Medium 用于增殖標本中的沙門氏菌
醋酸鉛培養(yǎng)基 Lead Acetate Medium 用于硫化氫試驗
SIM培養(yǎng)基 Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium 用于硫化氫、動力、吲哚試驗
乳糖肉湯 Lactose Broth 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌
EF-18 瓊脂 EF-18 Agar 用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)
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傳代前準備:
1.預熱培養(yǎng)用液:把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入 37℃水浴鍋內預熱。
2.用 75%酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈:注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶,放入微波爐內高火,8 分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養(yǎng)用液:取出已經預熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養(yǎng)箱內取出細胞:注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時要在酒精燈上燒口消毒。
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