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低分化結腸腺癌細胞
吹打分散細胞:
1.吹打制懸:用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。
2.吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入 10ml 離心管中。
3.平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以 1000轉/分鐘離心 6-8分鐘。
4.棄上清液,加入新培養液:棄去上清液,加入 2ml培養液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。
分裝稀釋細胞:
1.分裝:將細胞懸液吸出分裝至 2-3個培養瓶中,加入適量培養基旋緊瓶蓋。
2.顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應該不低于5×105/ml。zui后要做好標記。
繼續培養: 用酒精棉球擦拭培養瓶,適當旋松瓶蓋,放入CO2 培養箱中繼續培養。傳代細胞 2小時后開始貼附在瓶壁上。當生長細胞鋪展面積占培養瓶底面積 25%時為一個+,占50%為++,占 75%時為+++。
傳代細胞培養注意事項:
1.嚴格的無菌操作
2.適度消化:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應該注意培養細胞形態的變化,一旦胞質回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。
EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二鈉)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚紅 4ml,
加入蒸餾水定容至 1000ml。10磅 20min 高壓滅菌,使用時調節 PH 值到 7.4。注意 EDTA不能被血清中和,使用后培養瓶要*清洗,否則再培養時細胞容易脫壁。
細胞的復蘇 : 細胞復蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
在細胞凍存時加入溫保護劑,能大大提高凍存效果。常用的低溫保護劑是DMSO,它是一種滲透性保護劑,可迅速透入細胞,提高胞膜對水的通透性,降低冰點,延緩凍結過程,能使細胞內水分在凍結前透出細胞外,在胞外形成冰晶,減少胞內冰晶,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞的相關產品如下:
HCT-116 低分化結腸腺癌細胞
U251 神經膠質細胞瘤細胞
NCI-H345 小細胞肺癌細胞
M17 神經母細胞瘤細胞
NCI-H446 小細胞肺癌細胞
LAN-5 神經母細胞瘤細胞
Bcap-37 乳腺髓樣癌細胞
BT474 乳腺導管瘤細胞
SK-N-SH 神經母細胞瘤細胞
MDA-MB-157 乳腺癌細胞
MDA-MB-231 乳腺導管癌細胞
公司其他生物培養基產品有:
卵磷脂吐溫80營養瓊脂 Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 用于化妝品細菌總數測定(GB標準)
乙酰胺瓊脂 Acetamide Agar 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(GB標準)
十六烷*基溴化銨瓊脂 Cetrimide Agar 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(GB標準)
甘露醇發酵培養基 Mannitol Medium 生化試驗培養基,用于細菌(如金黃色葡萄球菌)甘露醇發酵試驗(GB標準)
明膠培養基基礎 Gelatin Medium Base 生化試驗培養基,用于細菌明膠液化試驗(GB標準)
綠膿菌素測定培養基(PDP) King Medium A 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗(GB標準)
乳糖膽鹽培養基 Lactose Bile Medium 用于化妝品中糞大腸菌群的測定(GB標準)
TTC卵磷脂-吐溫80-營養瓊脂 TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar 用于化妝品中細菌總數測定(GB標準)
HC瓊脂基礎 HC Agar Base 用于化妝品中霉菌總數測定(Acumedia 方法)
改良LETHEEN瓊脂基礎 LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 用于化妝品中微生物檢測(Acumedia 方法)
HCT-116
RAMOS B淋巴細胞瘤細胞
GLC-82 肺腺癌細胞
THP 1 單核細胞型淋巴瘤細胞
H1299 肺腺癌細胞
U-937 淋巴瘤細胞
NCI-H157 非小細胞肺腺癌細胞
RPMI-8226 多發骨髓瘤細胞
LIEP-P 小細胞肺癌細胞
SHG-44 腦惡性膠質瘤細胞
NEI-H209 小細胞肺癌細胞
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