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哪些原因造成實(shí)驗(yàn)反應(yīng)試劑盒靈敏度低
閱讀:1186 發(fā)布時(shí)間:2015-6-10對(duì)應(yīng)實(shí)驗(yàn)新手經(jīng)常反應(yīng):實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,包括陽(yáng)性對(duì)照、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡。要求廠家技術(shù)答復(fù)這是什么原因造成的?
我司技術(shù)答可能原因:
1.試劑盒超過期, 超過有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào); 試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行保存,受高溫影響。
2.試劑、樣品用前未平衡至室溫
3.加入試劑的體積和時(shí)間有誤, 移液器計(jì)量不準(zhǔn),吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔;
4.洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力
5.孵育時(shí)間及孵育溫度未達(dá)到要求 ,反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時(shí)注意溫度并及時(shí)調(diào)整。
6.洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求;洗滌沖擊力太大。浸泡時(shí)間太長(zhǎng);
7.顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入;
8.底物作用時(shí)間不夠;
9.蒸餾水水質(zhì)有問題;
實(shí)驗(yàn)前應(yīng)做好的準(zhǔn)備:
1.實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)試劑未過期。 不要將試劑盒長(zhǎng)時(shí)間置于常溫下,按使用規(guī)定儲(chǔ)藏。
2.確定所使用的試劑體積正確,加入時(shí)間適當(dāng)。 校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應(yīng)*。
3.確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈,確認(rèn)配制洗液的純化水達(dá)到要求且未受污染。
4.孵育溫度應(yīng)控制在 37-38℃,孵育時(shí)間嚴(yán)格按照說明書操作。 保溫期內(nèi)不宜多開門,以免影響保溫。
5.嚴(yán)格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,減小洗滌沖擊力,按說明書要求置留洗滌液時(shí)間和洗滌次數(shù)。
6.顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
7.準(zhǔn)確定時(shí)。
8.測(cè)定蒸餾水配制試劑對(duì)酶免疫法的影響。