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繪制標準曲線圖不再是難題
閱讀:2143 發布時間:2015-7-16不管是實驗新手還是檢測做實驗的老師在ELISA實驗檢測時都涉及到標準曲線的問題,標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果,甚至是關系到實驗的成敗,那么究竟如何繪制或制作標準曲線呢?有幾點需要注意呢?讓上海恒遠生物科技有限公司小編為您詳細介紹做標準曲線樣品檢測時的幾個問題需要注意情況。
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。
3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
5、標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999.
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