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為什么同一批次提取蛋白跑出的條帶不一致
閱讀:3821 發(fā)布時間:2017-3-23在做蛋白提取實(shí)驗(yàn)中,也許有的同學(xué)都會提出這樣的疑問:每次提蛋白后會將樣品在短時間內(nèi)重復(fù)2-3次WB,但是每次跑出的條帶趨勢不一致,上樣量和其他條件都沒有變,內(nèi)參基本是整齊穩(wěn)定的,不知道為什么目的條帶就是不一致?這是什么原因呢?
影響因素太多了,實(shí)驗(yàn)中的任何任何一個步驟稍微有點(diǎn)差異都能產(chǎn)生不同的結(jié)果,下面簡單說三點(diǎn),可以用作參考。
1.你蛋白的問題,雖然是同一批的,但是可能在蛋白表達(dá)與純化過程中難免會出現(xiàn)個別的異類;
2.你的操作流程,不管做什么都會有誤差,不可能每次的做的都一樣,我們只能減少誤差,所以可能你覺得自己每次都做得一樣,但某個小細(xì)節(jié)你并沒有發(fā)現(xiàn);
3.試劑,也許你的試劑已經(jīng)不能用了,或者溶度不對了都會影響你的實(shí)驗(yàn)。
做一個實(shí)驗(yàn)來說*原則就是,也許你這次做出來了下次就做不出來了,每次做的時候?qū)懴聛恚灰勇闊@樣做錯了能省很多時間。